基于钯膜的电化学pH调控新方法及电化学驱动DNA酸-碱PCR的前期研究

来源 :厦门大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lee_liuyun02
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
pH是日常生活和生产、化学和生物体系中广泛涉及的参数之一。溶液环境的pH值控制着许多的化学和生命过程。分子机械性能的改变,纳米粒子及高聚电解质静电组装,分子表面自组装等都与pH密切相关;在生命科学领域中,作为生物活性催化剂的酶,只有在各自的最适pH下才能表现出较高的催化活性;作为日常生物生命反应场所的体液环境与细胞内环境,其pH值也有非常严格的控制;而作为生命遗传信息载体的DNA,其构型构象变化、基因表达等都受其环境pH值的影响。因此,长期以来,科学家们对建立和发展pH值的检测与调控方法投注了极大的热情和努力。然而,现有文献报道的各种pH调控方法都存在各自的不足之处,缺少一种不引起溶液总体积改变,不引入副反应杂离子、快速且大幅度调控溶液pH值的pH调控方法。   基于此,本课题组王永春师兄的博士论文首先提出了一种基于透氢导电薄膜与双室串联电解池构型的原位电化学pH调控方法,并进行了大量的前期实验。该方法特别适用于需实时改变溶液pH值的各种研究与应用。本论文的重点在于:共同完善基于该原理的电化学pH调控的实验平台,具体实现电化学pH调控并应用于DNA酸碱变性复性的初步研究;同时,进一步完善串联双室电解池,减小溶液层厚度以减轻扩散对传质的影响,并使其满足与其他诸如荧光光谱等对生物样品损害较小的检测技术联用;最后,初步尝试基于电化学驱动下DNA酸-碱变性-复性过程的聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)研究。具体内容如下:   (1)完善了基于透氢导电薄膜与双室串联电解池构型的原位电化学pH调控方法的实验平台,摸索条件,使其能构实现在短时间内快速、实时、大范围和循环调变溶液样品pH值。从近中性pH值开始,pH调控范围可达±4~5个单位。   (2)建立了电化学pH调控-UV光谱检测联用平台,并将该平台应用到DNA酸-碱变性-复性过程的研究。研究表明,溶液pH值在5.4~11.4范围内的原位周期性调节可驱动290bp DNA的酸-碱变性-复性过程,紫外吸收光谱在260nm的特征吸收峰发生相应的周期性涨落。   (3)在以上的基础上,构建了立式串联双室电解池,以实现在不引入外界强制对流措施的情况下,减小工作室溶液pH达到均一状态所用时间,并且该构型将有可能应用于与荧光光谱检测技术联用。   (4)在所建立的电化学pH循环调控方法及DNA酸-碱变性-复性的基础上,为尝试电化学酸-碱PCR的设想进行了Taq酶的碱耐受性及电化学耐受性实验。研究结果表明,Taq酶可经受11.5的碱性环境;而电化学pH调控环境则对其有较为严重的损坏作用。初步推断Taq酶在电极上发生反应而遭严重损坏,若以两面分别由阳离子交换膜与阴离子交换膜封堵而成的U型槽作为PCR场所,则可将PCR体系与电极隔离,并且槽内溶液pH值也将会随着外部工作室中环境pH值的变化而变化,有可能实现电化学pH调控下的酸-碱驱动PCR。  
其他文献
量子点是尺寸在量子限域范围内的半导体纳米晶。量子点自发现至今,凭借其优良的光学和光电性质受到了广泛关注。目前,以镉的硫族化合物为中心的Ⅱ-Ⅵ量子点已经得到了一定应用
我的爷爷今年70岁,不幸患上了老年痴呆症.rn爷爷很健忘,刚刚还端在手里的水杯,忽然间却找不到了;在家里分不清方向,常常问卫生间在哪;一到晚上就出现幻觉,全家人正在酣睡,他
分子识别是超分子化学研究领域中重要分支之一,包括对中性分子、阳离子和阴离子的识别。因阴离子在化学、生物、医药、环境等领域的重要作用,阴离子的识别和传感研究备受关注
开花是植物由营养生长向生殖生长过渡的转折点,开花时机直接影响种子产量和植物的成功繁殖。植物开花起始时间的调控极其复杂,由外部环境因素与内在遗传因子产生多种信号精确控
自1985年C60被发现以来,富勒烯的研究取得了长足的进步,尽管在此期间发现了很多富勒烯的新成员,独特的结构和物化性质也都表明其在生活和科研的各个方面都有着广泛的应用前景,然
系统测试设备特点轩宇公司系统设备基于航天成熟的工控CPCI结构,具有强抗冲击和振动性、开放性、模块化、易扩展的结构特点;系统配置的软件平台融合了多种先进技术,特别是实
无论是在工业现场、平安城市指挥中心,还是在商业空间、市政服务大厅,作为显示平台的大屏幕显示系统日趋重要,它的正常运行不仅关系着企业营收、设备运转,甚至与公共安全也变
老一辈的新闻家把传统的新闻写作技巧和文本形式统称为新闻界的十八班武艺,在网络技术日益发达的今天,新闻的传播环境发生了巨大变化,虽然这些武艺一直都被当作学新闻需要练
羟基磷灰石(HA)是一种磷酸氢钙盐,其中Ca/P的摩尔比为1.67。磷酸氢钙盐是牙齿与骨骼的主要成分,而羟基磷灰石是热力学性质较为稳定的一种,且与骨骼矿物结构最为相似的一种磷酸氢钙盐。因此羟基磷灰石是一个很好的人体骨骼组织修复和异种移植材料。纯的羟基磷灰石材料脆性较大且强度较低,故许多研究者考虑将其与高聚物制成复合材料,以扩宽其应用。水飞蓟宾是水飞蓟素的有效药物成分,有明显的保护及稳定肝细胞膜的作
黄酮类化合物是许多植物的二级代谢产物,广泛存在于自然界中,因其广谱的生理活性,如抗癌、抗氧化及抗菌活性等,而受到人们越来越多的关注。天然二氢黄酮橙皮苷大量存在于柑橘类植物中,药理作用广泛但是因其水溶性及脂溶性较差而影响了它的应用。橙皮苷来源丰富,由它转化为其它药用黄酮类物质具有成本低、合成步骤少、操作简单、收率高等优点。为了满足生理活性物质筛选及新药研究开发的需要,本论文主要围绕橙皮苷化学转化半合