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背景癫痫是一种常见多发的以大脑神经元异常放电引发突然短暂反复发作为特征的神经系统疾病,严重威胁人类生命与健康。目前临床上癫痫的治疗主要依靠药物疗法,但现有的药物无法适用所有患者且毒副作用大。瑞替加滨是唯一一个被FDA批准上市的用于成人部分发作辅助治疗的KCNQ钾通道激动剂药物。KCNQ钾通道在神经兴奋性调节中起着基础而关键的作用,以瑞替加滨为代表的KCNQ激动剂因而被寄予厚望,其抗癫痫作用机制被广泛研究,但是目前已有的研究多为体外电生理记录,而对与癫痫相关脑区(如海马)神经元电活动的影响不清楚。目的建立稳定的自由活动动物脑电信号采集系统,通过对自由活动正常大鼠海马神经元电活动的记录分析,研究以瑞替加滨为代表的KCNQ钾通道激动剂对大鼠海马神经元放电的影响,探索该类化合物治疗癫痫的神经电生理作用机制,为发展新型抗癫痫药物提供理论指导。方法本实验采用健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠(250-350g),行常规开颅手术,在海马CA1区手术植入单电极2*4阵列,动物术后常规护理,自由饮食,恢复7天。电生理记录时,动物处于自由活动状态,其脑部电极可稳定记录神经元放电,且这种放电可持续存在1-2周。运用多通道在体记录系统,将前置放大器接于电极板,电信号传输进入采集器,储存于Recorder16系统,数据进行离线分析。运用多通道在体记录系统观察瑞替加滨对自由活动大鼠海马神经元的影响,实验时先稳定记录电信号10min,腹腔注射给予动物15mg/kg瑞替加滨,再连续稳定记录和采集电信号360min。此外,观察瑞替加滨能否反转钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)或XE991导致的自由活动大鼠海马神经元的兴奋性升高,电信号采集方法同前,在腹腔注射给予4-AP(5mg/kg)电信号稳定记录20min后或XE991(10mg/kg)电信号稳定记录120min后,腹腔注射给予瑞替加滨15mg/kg,稳定记录360min。所有电信号均存储于电脑中,采用Offline Sorter进行离线分析。结果在我们实验室成功建立了基于动物实验的脑电信号采集系统,实现了对自由活动动物脑电活动的记录。运用这个系统,我们将海马神经元进行分类并考察瑞替加滨对海马神经元放电的影响。我们发现大鼠腹腔注射15mg/kg瑞替加滨能显著抑制海马锥体神经元与中间神经元的自发放电。此外,同剂量瑞替加滨能翻转钾通道抑制剂4-AP (5mg/kg,0.2ml/100g)或XE991(10mg/kg,0.2ml/100g)导致的海马神经元兴奋性升高。结论我们的工作首次采用自由活动大鼠在体记录方式考察KCNQ钾通道激动剂瑞替加滨对大鼠神经元核团放电的影响,发现该药物对海马锥体神经元和中间神经元的兴奋性均有抑制作用,并可逆转钾通道抑制剂导致的兴奋性升高,部分揭示了瑞替加滨治疗癫痫的作用机制。