混料试验设计对多种生子因子配比优化自体颗粒移植脂肪血管生成的研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wzsman
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目的探索多种生长因子包括血管内皮细胞生长因子165(vascular endothelial growth factor 165, VEGF165)、血管内皮生成素(angiopoietins, Ang-1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)按单形格子方案进行浓度配比,对自体移植颗粒脂肪的血管生成以及脂肪存活的作用效果,寻找促进自体脂肪移植成活的生长因子最优浓度配方。方法健康成年wistar雌性大鼠36只,体重(340+20)g,随机分为9组,每组4只。按三因素单形格子配比方案配制Ang-1:b-FGF:VEGF 165三种生长因子混合液化9组,配比方案为①1:0:0②0:1:0③0:0:1④1/2:1/2:0⑤0:1/2:1/2⑥1/2:0:1/2⑦1/3:1/3:1/3⑧2/3:1/6:1/6⑨1/6:2/3:1/6。每组各只大鼠下腹部及背部脱毛,选取腹腔内脂肪,制备同龄Wistar成年大鼠肠系膜纯脂肪颗粒1ml,向脂肪中各加入6u1不同配比浓度的VEGF165、Ang-1、b-FGF混合液,混匀后注入大鼠背部皮下四点,每点0.25m1。常规饲养15周后切取移植脂肪,送做病理学检查,苏木精伊红染色观察移植成活脂肪细胞形态,免疫组织化学染色检测CD34的表达,计数移植脂肪中毛细血管数目;运用统计遗传算法优化试验结果,构建Scheffe回归模型进行优化分析,得到移植脂肪的血管最大值,确定最优生长因子浓度配比。结果免疫组织化学检测计数Ang-1、b-FGF、VEGF 165各药物配比组中毛细血管数量,各组之间差异有统计学意义(P<0.05);遗传算法优化结果中,最高血管数目为12.092,此时对应的VEGF165:Ang-1:bFGF比例为0.380:0.280:0.340。结论VEGF165、Ang-1、bFGF三种生长因子单个或联合应用,可以不同程度地促进自体移植颗粒脂肪的成活;当VEGF165、Ang-1、bFGF三种生长因子联合,且当其浓度比为0.380:0.280:0.340时,移植脂肪内新生血管密度最高,生长因子促移植脂肪成活作用最强。
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