鸡包涵体肝炎过程中体液免疫规律的研究

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为了研究鸡包涵体肝炎(Inclusion Body Hepatitis,IBH)过程中体液免疫的变化规律,采用禽腺病毒Ⅷ型毒株(FAV-8)1:50倍稀释,0.3mL/只口服接种100只1日龄SPF雏鸡,分别在1,3,5,7,9,12,15,20,25,30dpi迫杀攻毒组10只,对照组10只,制备外周血、各淋巴器官的淋巴细胞悬液,用流式细胞仪检测血液、法式囊及脾脏中B淋巴细胞的变化规律。分别用ELISA法、散射比浊度法和固定病毒稀释血清法检测外周血清IgG、IgM、中和抗体变化规律。并同时采集肝组织和各淋巴组织等,制备石蜡切片,做H.E.染色,观察病理变化。结果显示:(1)法氏囊Bu-1ɑ+ B淋巴细胞在1、3dpi极显著高于对照组(p<0.01),15dpi显著低于对照组(p<0.05)。脾脏中Bu-1ɑ+ B淋巴细胞对照组与功毒组无显著差异(p>0.05)。血液中Bu-1ɑ+ B淋巴细胞在1dpi极显著低于对照组(p<0.01),在3、20dpi显著低于对照组(p<0.05),12 dpi显著高于对照组(p<0.05)。(2)外周血中IgG在1、20dpi极显著低于对照组(p<0.01),7、15、25dpi显著低于对照组(p<0.05),12、30dpi显著高于对照组(p<0.05),即在病变高峰期显著高于对照组,与血液Bu-1a+ B淋巴细胞的变化规律一致。(3)血清中IgM含量在1~3dpi较高,均在0.88mg/ml以上,随后急剧下降到很低的水平,不足0.10mg/ml,并一直持续到最后。1、3、5dpi略高于对照组,但差异不显著。(4)血清中和抗体在3dpi开始到9dpi缓慢上升,但效价持续在较低水平,从9dpi开始显著升高,到20dpi达到高峰,15~25dpi维持在较高水平,30dpi稍有下降。(5)IBH病毒使免疫器官有不同程度的出血,淋巴器官中B淋巴细胞大量流失和损伤,法氏囊B淋巴细胞的流失最为严重。以上结果表明:血液中Bu-1a~+ B细胞初遇病毒攻击时,一方面受损严重,另一方面B细胞转化为产生IgM和IgG的浆细胞,因而显著降低;同时激活法氏囊Bu-1a~+ B淋巴细胞大量分裂增殖以供给血液,因此在初遇病毒时显著上升;从而血液IgM和IgG在第一次病变高峰的3-5dpi高于对照,但非显著;然而由于在第一病变高峰时产生的记忆B细胞在第二次病变高峰时被大量激活增殖,因而表现为12 dpi时血液Bu-1a~+ B淋巴细胞和IgG显著高于对照组、中和抗体显著增加。并且尽管12 dpi后IgG又显著下降,但中和抗体持续处于较高水平。因此,此后的病变高峰表现不明显,发病得以缓解,发病率降低。说明体液免疫在鸡包涵体肝炎过程中具有重要作用。
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