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支气管哮喘(以下简称“哮喘”)是一种由多种细胞及其组分参与的慢性气道炎症性疾病,绝大部分患者可经吸入性糖皮质激素治疗得到控制,但仍有5-10%的患者需大剂量吸入甚至口服糖皮质激素才能控制或仍未获控制,称之为重症哮喘(Severe asthma,SA)。SA发病率虽低但产生的医疗负担却超过哮喘总费用的50%。由于传统控制方法疗效不佳,患者的生活质量常明显降低,预后不佳,死亡风险高。如能早期发现SA趋势,进行及早的干予,其预后可能会大大改善。近年来国内外多项研究发现:气道黏膜中多形核中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophils,PMN)、嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)募集、活化及组蛋白去乙酰化酶2(Histone deacetylase 2,HDAC2)活性降低与SA密切相关。本研究拟通过对受试者外周血血清粒细胞活化标志物髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、中性粒细胞弹性蛋白酶(Neutrophil elastase,NE)及嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(Eosinophil cationicprotein,ECP)浓度,外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中HDAC2表达水平的检测,了解它们与SA的关系,以寻找出简便、易测的评估重症哮喘表型的生物学标志。目的:了解粒细胞活化和HDAC2表达与SA的关系,以探索早期预测和辨别SA的生物标志物。方法:无菌取18例SA患者(男/女=8/10,年龄48.0±10.8岁)、18例轻中度哮喘患者(男/女=9/9,年龄45.2±11.7岁)和18例健康对照者(男/女=10/8,年龄39.1±9.8岁)空腹静脉血,EDTAK2抗凝获得血浆,分离血细胞获得PBMCs。通过ELISA法测定受试者血清粒细胞活化标志物MPO、MMP-9、NE及ECP活性,Western-blot测定PBMCs HDAC2表达水平,结果表达为(HDAC2/GAPDH)。结果:1.各组受试者粒细胞活化标志的差异:重症哮喘组受试者粒细胞活化指标MPO、MMP-9、NE及ECP分别为102.43±28.19ng/ml、992.97±176.44pg/ml、9.40±0.99ng/ml和232.85±48.37ng/ml,均显著高于轻、中度哮喘组(分别为:48.56±8.78ng/ml、554.35±99.03pg/ml、8.01±1.27ng/ml、105.30±26.93ng/ml)(p均<0.05)和健康对照组(分别为:37.46±9.93ng/ml、374.00±79.08pg/ml、4.66±0.64ng/ml、40.87±15.35ng/ml)(p均<0.05);轻中度哮喘组受试者外周血MMP-9、NE及ECP浓度值显著高于健康对照组(p<0.05),而MPO浓度值则无明显差异(p﹥0.05)。2.各组受试者HDAC2表达的差异:重症哮喘组PBMCs HDAC2表达水平HDAC2/GAPDH:0.19±0.09,较轻、中度哮喘组(0.60±0.08)及健康对照组(1.09±0.26)显著降低,差异有统计学意义(p均<0.05);轻中度哮喘组PBMCs HDAC2表达较健康对照组低,差异有显著性(p<0.05)。3.粒细胞活化标志物与肺功能和哮喘控制水平的关系:MPO、MMP-9、NE及ECP与FEV1%pred.之间呈显著负相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r分别是:-0.60、-0.75、-0.43和-0.67,p<0.01);与FEV1%FVC之间呈显著负相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r分别是:-0.52、-0.60、-0.42和-0.50,p<0.05);与ACT之间呈显著负相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r分别是:-0.69、-0.67、-0.50和-0.70,p<0.01)。4.HDAC2与肺功能和哮喘控制水平的关系:HDAC2与FEV1%pred.及FEV1%FVC之间呈显著正相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r分别是0.68和0.61,p<0.01);与ACT之间呈显著正相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r=0.68,p<0.01)。结论:粒细胞活化指标MPO、MMP-9、NE和ECP升高提示重症哮喘患者存在中性粒细胞和嗜酸粒细胞活化,其程度显著高于轻中度哮喘患者;PBMCs HDAC2在重症哮喘组表达明显降低提示该类患者的皮质激素敏感性降低,激素治疗的效果可能不佳。