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放射治疗是鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)的主要治疗方法之一,但放疗抗拒仍然是许多病例成功治疗的严重阻碍。为了鉴定参与这种放射抗拒性的蛋白质,我们首先建立了来自ENKTL系的SNK-6细胞的辐射抗性亚克隆细胞系(SNK-6R),收集其经过6轮亚致死剂量电离辐射后存活的细胞,传代培养。随后的细胞周期实验显示,在SNK-6R细胞系中,放疗后G2-M和S期的细胞数量增加。Western Blot用于评估细胞周期蛋白表达的差异。结果显示,在SNK-6R中CDK4,Cyclin B1和Cyclin D1的表达下调,表明这些细胞周期蛋白与ENKTL放射抗性的发生有关,不仅是用于预测患有放疗的ENKTL患者的预后的潜在生物标志物,而且还是潜在的生物学靶标用于防止辐射抗性。 目的: 通过亚致死剂量法建立人鼻型结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤(ENKTL)来源的SNK-6细胞系的放射抗拒株,命名为SNK-6R,通过Western Blot检验两种细胞系相关蛋白质的表达差异,从而验证出与细胞放射抗拒相关的蛋白质,从而用于预测患有放疗预后的潜在生物标志物,寻找潜在的生物学靶点。 方法: 1.利用亚致死剂量法建立SNK-6的放射抗拒细胞株。 2.利用CCK-8、细胞凋亡实验、细胞周期试验等验证新建细胞株的放射抗拒特性。 3.应用Western Blot验证相关蛋白如CDK4,Cyclin B1和Cyclin D1、Bcl-2等表达的差异。 结果: 1.通过CCK-8实验结果显示,SNK-6R的增殖曲线明显优于SNK-6细胞系,细胞周期实验显示SNK-6R细胞在G2-M期和S期被阻滞更加明显,细胞凋亡实验显示SNK-6R细胞系的耐放射性更高。 2.通过Western Blot实验结果显示,与SNK-6细胞系相比,SNK-6R的CDK4,CyclinB1和CyclinD1表达下调。然而,在两种细胞系中Bcl-2表达没有显着差异。 结论: 人鼻型结外自然杀伤/T细胞淋巴瘤(ENKTL)来源的SNK-6细胞系,发生放射抗拒性后,CDK4和CyclinD1,表达下调,或许可以成为预测ENKTL患者的放疗预后,成为治疗的潜在靶点。