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目的探讨硫酸镍(NiSO4)对大鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活力、mRNA和蛋白表达水平及其代谢产物的影响。方法选择健康Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组,即生理盐水(NS)组,NiSO4 1.25mg/kg、2.50mg/kg和5.00mg/kg组,腹腔注射染毒,1次/d,连续30 d,并观察各组大鼠体重和进食量的变化。染毒结束次日,颈椎脱臼法处死大鼠,迅速摘取睾丸后称重,计算睾丸脏器系数。制备检测样本,用石墨炉原子吸收光谱法检测各组大鼠睾丸组织镍(Ni)含量;分光光度法测定大鼠睾丸细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及睾丸组织匀浆中葡萄糖(GLU)和乳酸(LD)的含量;实时荧光定量PCR (RT-PCR)技术检测睾丸线粒体能量代谢相关酶SDH、MDH和GSH-Px的基因表达水平,Western Blotting技术检测能量代谢相关酶SDH、MDH和GSH-Px的蛋白表达水平。结果(1)NiSO4染毒3W后,高剂量组体重明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);睾丸脏器系数NiSO4各染毒组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。NiSO4 2.50和5.00mg/kg组睾丸中Ni含量与正常对照组比较显著升高(P<0.05);大鼠睾丸细胞线粒体中SDH和MDH酶活力随着硫酸镍染毒剂量的增加呈下降趋势,且NiSO42.50和5.00mg/kg组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而GSH-Px酶活力仅高剂量组与对照组比较明显降低(P<0.05)。NiSO42.50和5.00mg/kg组大鼠睾丸组织匀浆中GLU含量降低,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而NiSO4各剂量组LD含量与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)实时荧光定量PCR检测结果显示:SDH、MDH和GSH-Px基因表达均呈下降趋势,NiSO42.50和5.00mg/kg组MDH和:SDH mRNA表达水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而GSH-Px mRNA表达水平仅NiSO4 5.0mg/kg组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blotting检测结果显示:NiSO4各组SDH、MDH和GSH-Px蛋白表达水平呈下调趋势,其中NiSO42.50和5.00mg/kg组SDH蛋白表达水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),NiSO4各染毒组MDH蛋白表达水平与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而GSH-Px仅NiSO4 5.00mg/kg组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论NiSO4致雄性大鼠生殖系统损伤可能与其干扰大鼠睾丸细胞能量代谢有关。