耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及同源性研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aihechashui
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目的:对甘肃省人民医院下呼吸道标本分离的MRSA(耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌)的耐药谱特征、SCCmec分子生物学分型及同源性进行研究,以了解致下呼吸道感染的MRSA的生物学特点,同时对其qacA/B(耐消毒剂基因)、PVL(杀白细胞毒素基因)的携带情况进行研究,为临床防治及抗感染治疗提供理论依据。  方法:以甘肃省人民医院2012年7月至2013年3月从临床分离的69株MRSA菌株为研究对象,用头孢西定纸片扩散法对MRSA菌株进行初步筛选;应用PBP2a蛋白胶乳凝集试剂法对MRSA进行确认;按2013年CLSI规定的标准用K-B法检测MRSA菌株对19种常用药物的耐药性,利用WHONET5.6软件对耐药性结果进行分析;应用PCR技术、琼脂糖凝胶凝胶电泳扩增并检测mecA、femA基因的携带情况;应用PCR技术、琼脂胶凝胶电泳对分离的MRSA菌株进行SCCmec分型;应用RAPD(随机扩增多态性DNA)技术对MRSA菌株进行同源性分析;应用PCR技术、琼脂糖凝胶电泳对MRSA菌株的qacA/B(耐消毒剂基因)、PVL(杀白细胞毒素基因)携带情况进行检测。  结果:从临床下呼吸道标本中分离的MRSA对青霉素和苯唑西林和头孢西丁、头孢噻肟均耐药,对四环素、复方新诺明药物的耐药率较高,分别达到了66.67%、88.41%,而其他药物的耐药率均在40%以下,未发现耐万古霉素的MRSA菌株。69株MRSA实验菌株PBP2a蛋白实验均为阳性;实验菌株的mecA、femA基因检测均为阳性,携带率100%,与PBP2a蛋白实验实验结果一致。69株MRSA菌株SCCmec分型检测均为ccrAB3型;经RAPD技术将实验菌株共分为5个克隆株,其中有6株未能进行分型;69株MRSA菌株中共有5株PVL基因阳性,携带率7.25%;实验菌株的qacA/B基因检测全部为阳性,携带率100%。  结论:临床下呼吸道标本分离的69株MRSA菌株以呼吸科为主,绝大多数为住院患者,以呼吸道感染患者为主。MRSA感染已成为了多重耐药趋势,分离的5种基因型的MRSA菌株在流行病学上无明显的相关性。MRSA菌株主要以不同的克隆型在各科室之间、科室内部进行传播。本院的MRSA感染主要以Ⅰ型和Ⅱ型为主,其中未能进行分型的MRSA菌株可能为新的型别,需要进行进一步的分型研究,为发现新的克隆型别提供一定的理论依据,除此之外本院分离的MRSA菌株的分子生物学分型一致,有较高的同源性,应该引起重视,加强医院耐药管理检测,合理使用抗生素,预防医院内部MRSA的暴发流行。
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