论文部分内容阅读
目的：研究miR-133b在胃癌细胞系SGC-7901和BGC-823中的表达情况以及对其靶标HORMAD2、SLC6A1及HIF-1α表达的影响。方法：利用生物信息学方法,采用microRNA靶基因预测软件预测miR-133b靶基因,且进行基因功能的初步分析；构建RNAoligo-133b转染载体,瞬时转染进SGC-7901及BGC-823胃癌细胞中,采用实时荧光定量PCR检测转然后miR-133b的表达量,MTT及流式细胞术对其功能进行验证,并采用Western Blot检测miR-133b对细胞中HORMAD2, SLC6A1及HIF-1α蛋白表达的影响。结果：miR-133b成功转染进SGC-7901及BGC-823胃癌细胞内；qRT-PCR检测出miR-133b M转染组miR-133b表达水平较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05),转染效率很高；SGC-7901和BGC-823M组凋亡率升高(P<0.05)；24h和48h细胞存活率无明显差异(P>0.05),72h和96h存活率明显下降(P＜0.05); Western Blot结果显示HORMAD2, SLC6A1在胃癌细胞中为高表达,且与HIF-1α三者均可能是miR-133b在SGC-7901及BGC-823胃癌细胞中的作用靶点,并且miR-133bM组的表达水平明显下降(P<0.05)。结论：1.Has-miR-133b转染胃癌细胞系SGC-7901及BGC-823后可有效表达。2. HORMAD2、SLC6A1和HIF-1α可能为miR-133b的靶基因。3. HORMAD2在人胃癌细胞系SGC-7901和BGC-823高表达,SLC6A1在BGC-823和MGC-803高表达。4. SLC6A1和HIF-1α表达下调可促进SGC-7901和BGC-823的凋亡。