阿育魏实化学成分及其生物活性研究

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阿育魏实为伞形科糙果芹属植物阿育魏的成熟果实,作为传统的维吾尔医药,用于瘫痪,颤抖,肌腱无力,胸痛。煎水滴耳可增强视力,空腹内服除肾和尿道结石。配蜂蜜内服治白癜风和皮肤病,并可除鸦片烟瘾。此外,挥发油中所含麝香草酚,对口腔、咽喉黏膜细菌和真菌有抑制作用,对龋齿有防腐、局麻作用,还用于皮肤化脓性感染和驱钩虫作用。为了寻找新的有效部位及有效成分,本文对阿育魏实中挥发油与脂肪酸成分、抗氧化活性、酪氨酸酶活性、抑菌活性、化学成分的分离及微量元素的测定进行了研究。本文对阿育魏实的研究包括四个部分:(1)利用固相微萃取(SPME)结合气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析阿育魏实挥发性化学成分,为阿育魏实挥发性成分分析提供新方法。实验中以PDMS、CAR/PDMS、PDMS/DVB和PDMS/DVB/CAR为萃取纤维,GC-MS对挥发性成分进行分离鉴定,采用面积归一化法确定各成分的相对质量分数,并与传统的水蒸气蒸馏法(HD)提取的挥发性成分进行了比较。50/30μmDVB/CAR/PDMS纤维头能有效地吸附阿育魏实挥发性成分,其中相对质量分数较高的有γ-萜品烯(26.21%)、p-伞花烃(23.58%)、百里香酚(20.02%)。两种分析方法相互补充,共鉴定出22种挥发性成分;主要挥发性物质组分保持一致,HS-SPME-GC-MS能快速地获得其组成成分,可应用于阿育魏实挥发性成分的快速分析及质量控制。通过GC-MS分析了阿育魏实中的脂肪酸化学成分,主要成分是油酸甲酯(75.34%)。(2)采用琼脂扩散法及肉汤稀释法测定阿育魏实挥发油的抑菌作用;采用DPPH、ABTS和还原能力法研究了阿育魏实挥发油和不同萃取物的抗氧化作用,并测定阿育魏实中的总酚和总黄酮的含量。抑菌活性研究表明阿育魏实挥发油对12种受试菌均有不同程度的抑制作用,尤其对于革兰氏阳性菌和霉菌抑制效果较为明显;并且,阿育魏实挥发油和提取物具有不同程度的抗氧化能力,甲醇和挥发油的抗氧化活性相对优于其它溶剂萃取物。不同溶剂萃取物中总酚和总黄酮含量有较明显差异。结果表明阿育魏实挥发油具有较强的抑菌效果,挥发油和溶剂萃取物的抗氧化作用与酚类和黄酮类化合物具有很大相关性。(3)在对阿育魏实的系统分离中,对阿育魏实的醇提物依次用不同极性溶剂萃取,得到的各分段部位进行酪氨酸酶活性筛选,结果乙酸乙酯部位对酪氨酸酶的激活作用最强。以对酪氨酸酶的激活率为指导,对阿育魏实乙酸乙酯部位硅胶柱层析、重结晶逐级分离,得到单体化合物,经现代波谱初步鉴定,该化合物为单萜糖苷类化合物百里香酚-4-β-D-葡萄糖苷thymol-4-O-β-D-glucopyranoside,化合物酶活性筛选具有抑制作用。因此,对于阿育魏实中具有酪氨酸酶激活作用的活性成分,后续工作还需进一步深入分离。(4)通过电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES),对12个不同来源的阿育魏实中14种常见微量元素的含量进行了分析。结果表明:阿育魏实中主要存在的微量元素有Cu,Zn,Fe,K,Ca,Na,Mg,Mn,Sr,Cr,Ni;具有潜在生理毒性的元素为Pb,Hg,Cd。不同的阿育魏实的元素含量存在一定差异。
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