虫生真菌蛹虫草多样性与交配系统利用

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蛹虫草作为虫草属模式种,地理分布广泛,是研究子囊菌虫生真菌遗传的代表性物种。因此,研究蛹虫草的多样性及多态性、交配系统等具有重要意义。本研究利用采自不同地区蛹虫草种质资源开展研究,得到以下结果:1.通过对蛹虫草的多样性与多态性分析,采用对不同地区的样品进行形态学观察及多基因联合聚类方法,确定不同来源的蛹虫草多样性。其中,18个地区样品的序列与蛹虫草数据库信息比对具有较高同源性确定其均为蛹虫草。同时,选用8条蛹虫草特异性SCo T引物进行PCR扩增,探索蛹虫草的种内遗传关系及差异。结果发现存在一条特异性条带,可以作为评价蛹虫草发育的潜在分子标记。此外,不同地区表型多样性分组与联合聚类分析结果相似,SCo T方法更能体现出种内差异,可以作为地理簇分组的细化分析参考。2.利用高效液相色谱法及紫外分光光度计法,开展不同地区蛹虫草样品的活性物质(虫草素、虫草酸和腺苷)含量分析,发现不同样品间的活性物质含量存在差异。此外,类胡萝卜素溶解性和稳定性作为直观蛹虫草品质的参考指标。结果表明,不同地区样品类胡萝卜素含量及稳定性差异变化明显,样品的直观品质差异较大。3.蛹虫草不同菌株形态学观察发现存在三种不同类型的菌落形态,但其生长速率基本一致呈稳定线性生长。经交配型分子鉴定发现,三类菌株分别为单交配型MAT1-1或MAT1-2,和双交配型MAT1-1/1-2。三种类型菌株侵染柞蚕蛹能力方面相似,但形成子实体能力不同。利用透射电镜观察三种类型细胞发现,双交配型菌株存在两个细胞核,表明其为异核体。此外,通过对子实体不同发育阶段的交配型基因表达分析,发现交配型基因(MAT1-1-1,MAT1-1-2和MAT1-2-1)表达具有动态调控特点。双交配型菌株后代分生孢子群体中发生交配型偏离现象(MAT1-2型显著多于MAT1-1型),并且存在比例极低的双交配型菌株。此外,根据后代菌株交配型比例特点进行子实体诱导形成评价,交配型比例不同时,形成子实体情况差异大。
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