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背景:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种难治愈易复发的炎症性肠病,表现为腹痛、腹泻、直肠出血等肠道反应。急性爆发型UC和慢性复发型UC是人类UC常见的两种类型,前者临床表现为急性发病,病情较重且伴随炎症反应,而后者表现为发作期与缓解期交替。葡聚糖硫酸钠(dextra sulfate sodium,DSS)溶液为诱导UC模型的经典药物,可通过改变DSS的浓度和给药周期建立急性和慢性两种动物模型,模拟人类UC发病进程。研究表明,UC的发病可能与氧化应激、炎症反应及细胞凋亡有关,但确切的机制尚未阐明,也缺乏有效的治疗药物。而牛黄已被证实具有抗炎、抗凋亡和抗氧化应激等多种药理活性,体外培育牛黄(Calculus Bovis Sativus,CBS)已被CFDA批准作为天然牛黄的理想替代品,对UC具有潜在的疗效。目的:模拟人类急性爆发型UC和慢性复发型UC,分别建立急性和慢性UC模型,探究CBS对急性和慢性UC的疗效及可能的机制,为其发病机制和治疗提供参考。方法:(1)第一部分研究采用5%DSS溶液建立急性UC模型。28只雄性C57BL/6小鼠随机分为四组:正常对照组、模型对照组、CBS低剂量组、CBS高剂量组,每组7只。模型对照组、CBS 50 mg/kg组、CBS150 mg/kg组给予5%DSS溶液,小鼠连续7天自由饮用;同时CBS给药组分别进行50mg/kg和150 mg/kg灌胃给药;正常对照组小鼠正常饮用清水。在造模期间,每天对小鼠进行称重并记录腹泻和便血情况。第8天将小鼠处死,对其疾病活动指数(Disease activity index,DAI)进行评价。取结肠组织后测量结肠长度,并进行组织病理学检测和评分。同时测定结肠中MPO活性,MDA、NO含量和SOD活性,并采用RT-PCR技术对炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的mRNA水平进行检测;(2)第二部分研究采用2%DSS溶液建立慢性UC模型。正常对照组给予正常饮食饮水。模型及药物干预组分为3个周期建立慢性UC模型:第1周期给予2%DSS溶液5天,随后给予清水10天;第2周期与第1周期做相同处理;第3周期给予2%DSS溶液5天后将动物全部处死,整个造模过程共35天。CBS低剂量组和CBS高剂量组在造模期间的最后7天分别给予50 mg·kg-1·d-1和150mg·kg-1·d-1的CBS灌胃处理,正常对照组和模型对照组给予等量纯净水。定期测量小鼠体重及饮水量,观察小鼠腹泻及便血情况。待造模结束,将小鼠禁食后处死,评价其DAI指数,取结肠组织后观察其长度及形态变化,并对结肠组织进行HE染色和TUNEL染色,Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspase 3,Bcl-2,Bax表达水平。结果:(1)在急性UC模型中,CBS对DSS导致的体重减轻、DAI指数增长、结肠缩短均有显著逆转和改善,同时显著降低了结肠组织中MPO活性及MDA、NO含量,并提高了SOD活性。同时明显降低了结肠炎小鼠中TNF-α,IL-1β和IL-6等炎症因子的mRNA水平。表明CBS可能通过其抗氧化作用和抗炎活性对DSS诱导的急性UC发挥保护作用;(2)在慢性UC模型中,发现CBS明显减轻了结肠炎小鼠体重减轻、DAI增加,结肠损伤等病理特征,对结肠细胞的凋亡率有显著的改善作用。同时CBS明显抑制了慢性UC小鼠中Caspase 3、Bax的升高和Bcl-2的降低以及Bax/Bcl-2值的升高。说明CBS可能通过对凋亡相关蛋白的调节在慢性UC中的治疗发挥抗凋亡作用。结论:CBS对急性UC表现出较好的疗效,其潜在的机制可能与其抗炎和抗氧化活性有关,但其成分复杂,确切的作用靶点有待进一步研究;CBS可能通过抗凋亡作用对慢性UC也发挥了一定的保护作用,但其物质基础暂未明确,具体的凋亡通路值得深入探究。