紫萍总黄酮提取、纯化工艺及其抗癌、抗氧化损伤的活性研究

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mzhou2009
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紫萍在我国分布广泛,其全草是《中华人民共和国药典》收录的常用中药材品种之一,具有利尿、发汗、清热、解毒的功效;有少量文献报道,紫萍也具有防癌、抗癌的功效,但国内外未见对紫萍中抗癌活性部位及其抗癌机理的相关报道。论文以此为切入点,重点研究了紫萍中抗癌活性部位的制备工艺及其抗癌机理,这对紫萍的活性成分及药理药效等方面,具有重要的学术研究价值,同时对紫萍的利用和开发具有重要的指导作用。此外,论文自主设计、开发了定量分析薄层色谱图像的MATLAB程序,这将为中药现代化中的质量评价方法提供一种新的借鉴和参考。论文的主要内容和结果如下: ①以人肝癌细胞株SMMC-7721为试验材料,利用MTT比色法测定药物作用后细胞的存活率,确定紫萍中具有抗癌活性的有效部位。结果表明,紫萍的抗癌活性主要来自于其中所含的黄酮类化合物。各试验样品中黄酮含量越高,则该样品对癌细胞的抑制率也就越大。 ②对从紫萍中提取、纯化总黄酮的工艺条件进行了优化。(1)在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验确定了乙醇溶液提取总黄酮的最佳工艺参数:乙醇浓度60%,提取温度60℃,料液比为1∶10,提取时间2h,进行2次提取。(2)确定了壳聚糖絮凝除杂的最佳工艺条件为:壳聚糖粘度为30Pa·s,加入量为6%,絮凝温度为60℃,絮凝时溶液的pH值为5.5。(3)探讨了大孔吸附树脂法纯化紫萍总黄酮的工艺。研究结果表明,AB-8型大孔吸附树脂适合于紫萍总黄酮的纯化,纯化工艺条件为:上柱样品pH值为5-6,以1BV/h的速度流过树脂,待吸附平衡后,用4BV的蒸馏水以2BV/h的速度淋洗树脂,然后用70%的乙醇溶液以1BV/h的流速进行洗脱,收集第2-3BV时的洗脱液,其干燥品中的黄酮纯度可达80%左右。 ③论文以MATLAB软件为开发平台,自行编写程序,对薄层色谱图像中的各个展开点的物质含量进行了定量分析,并结合分光光度法和薄层色谱法,建立了一套多学科交叉的,简便、快速、准确、低成本的评价药物质量稳定性的方法。图像分析程序的可行性试验结果证明,该程序的分析结果与实际结果误差不超过3%,具有实用价值,可用于薄层色谱图像的定量分析。然后,利用论文中建立的质量稳定性的检测方法,以黄酮类化合物为研究对象,对相同工艺条件下制备得到的两批紫萍总黄酮的质量稳定性进行了研究,结果表明两批样品中总黄酮的含量和组成是稳定的,说明制备工艺具有良好的重现性。 ④以人肝癌细胞株SMMC-7721和人正常肝细胞株HL-7702为试验材料,研
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