花生组织特异表达抗黄曲霉相关基因的载体构建

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花生是非常重要的油料作物和经济作物。花生被黄曲霉侵染所造成的黄曲霉毒素污染对我国的花生生产、加工和贸易有很大影响。花生的成熟后期是黄曲霉侵染的关键时期。花生果种皮的完整性和强度对花生抗黄曲霉侵染起着重要的作用。花生果、种皮化学组成和结构的改善,可能培育高抗至免疫黄曲霉的花生品种,这在理论与实践上都具有重要意义。要降低抗病基因对转基因植株的不利因素,提高生物安全性,最直接的方法就是用特异启动子启动抗病基因,为了防止可能出现转基因沉默,最有效的办法就是利用MAR系列构建植物超量表达载体。本研究的主要结果如下:1.克隆了TTG1基因,测序结果与Genebank上蛋白数据对比显示同源性为91%。2.利用实验室已有的花生果种皮特异启动子(8、L19、S19)和TTG2转录因子、MYB61转录因子,构建了6个增强或改变花生果种皮组成结构植物表达载体。3.利用实验室已有的花生果种皮特异表达启动子(8、L19、S19)和CBF2转录因子、WRKY60转录因子、病程相关基因非表达子1(NPR1)基因,构建5个增强花生果种皮抗逆性植物表达载体。4.利用实验室已有的花生果种皮特异启动子(8、L19、S19)和核糖体失活蛋白(RIP)基因、几丁质酶(CHI)基因、兔防御素(MCP-1)基因、白藜芦醇合成酶(RS)基因,构建了10个增强花生果种皮抗性酶植物表达载体。5.利用实验室已有的大豆油体基因oleosin启动子和白藜芦醇合成酶(RS)基因,构建了2个花生种子特异表达载体。6.利用实验室已有的花生果种皮特异启动子(8、S19)和TTG1转录因子、病程相关基因非表达子1(NPR1)基因、核糖体失活蛋白(RIP)基因,构建了3个带MAR序列的花生果种皮特异超量表达载体。
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