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目的:运用体外细胞实验探讨黄连素（Berberine,BBR）对蛋氨酸与胆碱缺乏（methionine-choline-deficient,MCD）培养基与棕榈酸（palmitic acid,PA）诱导的非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）模型中NLRP3炎性小体激活及后续细胞焦亡（pyroptosis）的治疗作用,为黄连素在临床上治疗NASH提供进一步的实验依据。研究方法:（1）细胞:小鼠正常肝细胞系AML12细胞购自ATCC。（2）实验分组:设立空白对照组、MCD+LPS模型组、MCD+LPS+BBR（10μM、20μM）治疗组、PA模型组、PA+BBR（10μM、20μM）治疗组、MCD+LPS+NAC（10μM）治疗组、MCD+LPS+BBR（20μM）+H2O2（200μM）回复组、PA+NAC（10μM）治疗组、PA+BBR（20μM）+H2O2（200μM）回复组。（3）尼罗红染色法检测MCD+LPS、PA模型组脂质沉积的变化,以及BBR治疗组对NASH模型脂质沉积的影响作用,分别镜下观察定性以及使用流式细胞技术定量。（4）利用DCFH-DA荧光探针标记细胞,流式细胞技术法检测各个分组中细胞活性氧（ROS）水平。（5）使用MDA检测试剂盒检测各分组中细胞脂质过氧化水平。（6）使用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）技术检测各个分组中炎症因子TNF-α的mRNA表达水平。（7）使用caspase-1活性测定试剂盒检测各组细胞caspase-1活性水平。（8）使用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测各组炎症因子、炎性小体、细胞焦亡相关蛋白的表达情况。（9）采用GraphPad Prism 7软件进行统计分析,两组数据之间的比较采用独立样本t检验,p<0.05为差异有统计学意义。结果:（1）尼罗红染色法结果显示:与空白对照组相比,镜下观察MCD+LPS模型组、PA模型组脂质沉积明显增多（红色荧光明显增多）;与2个模型组相比,BBR治疗组镜下观察脂质沉积减少,且呈浓度依赖性,随浓度增大,能明显减少脂质沉积（红色荧光明显减少）;流式细胞技术法结果呈相同趋势。（2）流式细胞技术法结果显示:与空白对照组相比,MCD+LPS模型组、PA模型组ROS水平明显升高;与2个模型组相比,BBR治疗组能明显下调ROS水平,且呈浓度依赖,随浓度增大,能明显下调ROS水平;且NAC治疗组同样能下调ROS水平;而H2O2组对比BBR治疗组,能逆转已下调的ROS水平。（3）MDA试剂盒检测结果显示:与空白对照组相比,MCD+LPS模型组、PA模型组脂质过氧化水平明显升高;与2个模型组相比,BBR治疗组能明显下调脂质过氧化水平。（4）使用Real-time PCR结果显示:与空白对照组相比,MCD+LPS模型组、PA模型组TNF-α的mRNA表达明显增加,而BBR治疗组能下调TNF-α的mRNA表达量。（5）caspase-1活性测定结果显示:MCD+LPS模型组、PA模型组caspase-1活性水平明显升高,BBR治疗组能下调caspase-1活性水平,且与NAC治疗组作用相近,而H2O2组能逆转已下调的caspase-1活性水平。（6）Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,MCD+LPS模型组、PA模型组炎症相关的p-NF-κB p65、TNF-α蛋白表达水平明显升高,BBR治疗组可使其下降;与空白对照组相比,MCD+LPS模型组、PA模型组炎性小体相关的NLRP3、TXNIP、caspase-1蛋白表达水平明显升高,BBR治疗组可使其下降,且下调效果与NAC治疗组相近,而H2O2组能逆转已下降的蛋白水平;与空白对照组相比,MCD+LPS模型组、PA模型组焦亡相关的GSDMD-N蛋白表达水平明显升高,BBR治疗组可使其下降,且下调效果与NAC治疗组相近,而H2O2组能逆转已下降的蛋白表达水平。结论:（1）黄连素能有效下调MCD+LPS、PA诱导NASH模型中脂质沉积及脂质过氧化水平。（2）黄连素能有效下调NASH模型中NF-κB/TNF-α轴表达水平,有效抑制NASH模型中的炎症作用。（3）黄连素能抑制NASH模型中ROS的产生,且通过ROS下调TXNIP/NLRP3轴相关蛋白表达,从而抑制caspase-1的激活,最终抑制NASH中的细胞焦亡发生。