目的探讨具有祛瘀化痰之效的丹瓜方含药血清通过调控LKB1-AMPK-ACC信号通道改善胰岛素抵抗及脂质沉积的作用机制,为糖尿病胰岛素抵抗的基础研究及中医药治疗提供实验依据。方法1、运用MTT法检测细胞毒性、油红O染色观察脂质堆积情况以及葡萄糖氧化酶法检测糖耗量等实验方法,筛选出诱导HepG2细胞的最佳软脂酸与葡萄糖的浓度与时间,建立胰岛素抵抗合并脂质堆积模型。2、将实验分为6组:空白组、溶质组、模型组、二甲双胍组、5%丹瓜方组、10%丹瓜方组,根据分组情况同时予诱导液和大鼠血清进行干预24 h。用葡萄糖氧化酶法检测培养上清液里残存葡萄糖水平,计算糖耗量及胰岛素敏感指数,甘油三酯试剂盒检测细胞内的甘油三酯含量,通过油红O染色观察各组细胞内脂滴情况,用蛋白印迹法检测各组LKB1、AMPKα、P-AMPKα、ACC及P-ACC等蛋白的表达量。结果1、模型建立:通过MTT实验、油红O染色与检测葡萄糖消耗量可知0.25 mmol/L软脂酸与4 g/L糖浓度干预HepG2 24 h后,与正常组相比,细胞活性无明显下降（P>0.05）;油红O染色后可见细胞内大量红色脂滴呈串珠样排列,部分融合成较大的脂滴;葡萄糖消耗量显著降低（P<0.01）,胰岛素敏感性下降（P<0.01）,表示成功建立胰岛素抵抗模型。2、葡萄糖消耗量与胰岛素敏感指数:与正常组相比,模型组的葡萄糖消耗量明显减少（P<0.01）;与模型组相比,丹瓜方组与二甲双胍组的葡萄糖消耗量均明显增加（P<0.01）,胰岛素敏感指数均提高（P<0.01）,其中二甲双胍组、5%丹瓜方组、1 0%丹瓜方组的葡萄糖消耗量无明显差异（P>0.05）,二甲双胍组与10%丹瓜方组的胰岛素敏感指数均高于5%丹瓜方组（P<0.01）。3、TG含量:与正常组比较,模型组TG含量明显增多（P<0.01）;与模型组相比,丹瓜方组与二甲双胍组TG含量均显著降低（P<0.01）,其中二甲双胍组、5%丹瓜方组、10%丹瓜方组的葡萄糖消耗量无统计学意义,以10%丹瓜方组的TG含量最低,5%丹瓜方组最高。4、油红O染色:与正常组比较,模型组红O染色后观察的细胞内脂滴明显增多且密集;与模型组相比,丹瓜方组与二甲双胍组油红O染色后观察的细胞内脂滴明显减少,其中1 0%丹瓜方组减少地最明显,二甲双胍组和5%丹瓜方组无明显差异。5、Western blot:正常组与溶剂组的 LKB1、P-AMPKα、AMPKα、P-ACC、ACC各蛋白表达均无明显差异（P>0.05）;与正常组相比,模型组LKB1、AMPKα、P-AMPKα、P-ACC蛋白表达降低（P<0.01）,ACC蛋白表达增多（P<0.01）;与模型组相比,二甲双胍组和丹瓜方组LKB1、P-AMPKα、P-ACC蛋白表达增加（P<0.01）,ACC蛋白表达降低（P<0.01）,AMPKα蛋白表达无明显差异（P>0.05）,其中二甲双胍组、5%丹瓜方组、10%丹瓜方组的各蛋白表达均无明显差异（P>0.05）,结论1、丹瓜方增加胰岛素抵抗合并脂质变性的HepG2细胞内葡萄糖消耗量,提高其胰岛素敏感性。2、丹瓜方减少胰岛素抵抗合并脂质变性的HepG2细胞内TG含量,改善细胞内脂质堆积。3、丹瓜方改善胰岛素抵抗与脂质变性可能与活化LKB1-AMPK-ACC信号通路有关。