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本论文由综述、研究报告两部分组成。 第一部分为综述部分。第二部分为研究报告部分。研究报告由三部分组成。 综述部分介绍了增强化学发光体系的类型、增强剂和增强机理、增强化学发光免疫分析技术中的流动注射技术、磁性微粒技术和自动化检测技术;简要地概括和总结了近年来增强化学发光免疫分析法的研究进展;展望了增强化学发光免疫分析法的发展趋势。 我们在实验中发现白藜芦醇苷对鲁米诺-高碘酸钾-过氧化氢体系有强烈的抑制作用,建立了测定白藜芦醇苷的流动注射化学发光分析新方法。在选定的实验条件下,化学发光信号强度△I与白藜芦醇苷的浓度在4.6×10-9g/mL~2.0×10-6g/mL范围内分段成良好的线性关系,检测限为2.0×10-9g/mL,相对标准偏差为1.9%(c=1.0×10-7g/mL,n=11)。该方法已用于葡萄酒和中药虎杖中白藜芦醇苷含量的定量分析,结果满意。 利用固定有辣根过氧化物酶的毛细管柱作为流通池反应器,当鲁米诺-过氧化氢混合溶液流经反应器时,辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢体系产生化学发光,建立了一种简单、快速检测过氧化氢的流动注射化学发光分析新方法。在选定的实验条件下,化学发光信号与过氧化氢的浓度在1.0×10-8mol/L~1.0×10-4mol/L范围内分段成良好的线性关系,过氧化氢的检测限为9.0×10-9mol/L,对1.0×10-6mol/L的过氧化氢进行9次平行测定,方法的相对标准偏差为1.4%。本文首次利用毛细管内壁表面固定辣根过氧化物酶作为流通池反应器测定过氧化氢。酶的消耗量少、分析速度快、测量的灵敏度高。采用阴阳离子交换柱在线分离样品,已用于雨水中过氧化氢的测定,结果满意。 以HRP标记IgG抗体与未标记IgG抗体竞争毛细管内壁表面固定的IgG抗原,利用HRP催化对碘苯酚增强的鲁米诺-过氧化氢体系化学发光,建立了测定IgG抗体的流动注射增强化学发光免疫分析新方法。在选定的实验条件下,化学发光信号与未标记IgG抗体在稀释比为1:1×1011~1:1×1010间成良好的线性关系,相关系数为0.9960。对同一样品连续11次测定的相对标准偏差为6.5%。全部分析测定需20min。对血清样品中IgG抗体进行测定,结果比较满意。本文首次建立了以毛细管柱为固相载体测定IgG抗体的流动注射增强化学发光免疫分析新方法,实验证明本文测定IgG抗体的设计是可行的。以毛细管柱作为免疫反应器具有分析速度快,响应时间短,无峰展宽,固相免疫分离自动化的优点。毛 11 细管流通池反应器与填充式流通池反应器相比,液体在流动过程中受到的流动阻 力小,因此分析速度和响应速度快:与膜式的流通池反应器相比,操作简单。