血源性ACE抑制肽制备工艺及树脂分离规律研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ashwingangel
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血管紧张素转化酶(ACE)在血压调节中扮演着重要的角色,抑制ACE活性可以降低血压。食物源ACE抑制肽可减小化学合成类降压药物的副作用,其研究与开发具有一定的科学和实用价值。本研究以喷雾干燥猪血浆蛋白粉(PPSP)为对象,选用胃蛋白酶作为试验用酶,通过单因素和响应面试验,考察预处理温度、预处理时间、胃蛋白酶添加量(E:S)、酶解温度、酶解底物蛋白浓度、pH和酶解时间对PPSP水解度(DH)和ACE抑制率的影响,优选预处理与酶解工艺条件,建立酶解二次回归模型;并利用大孔吸附树脂(MAR)对酶解产物进行分离纯化,优化分离条件。结果表明:(1)适于胃蛋白酶酶解PPSP制备ACE抑制肽的预处理条件为:80℃水浴中加热20min。(2)适宜的酶解条件为:E:S为3000U g-1、酶解温度37℃、底物蛋白浓度5%、pH2.5、酶解时间3h;综合影响酶解DH与ACE抑制率的顺序为:pH> E:S>底物蛋白浓度>酶解温度>酶解时间,且其回归模型极显著(P<0.01),回归系数R2=0.969。(3)适于分离纯化PPSP酶解制备ACE抑制肽的树脂为S-8型;静态吸附的上样液pH值为2.5,吸附平衡时间为3.5h;洗脱剂为70%乙醇溶液,解吸平衡时间为30min。(4)在25℃、上样液pH值2.5的条件下,适于S-8动态吸附的上样液浓度为20mg/mL,流速为1.5mL/min;以70%乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱液流速为1.0mL/min,动态解吸时间为80min。
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