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目的:白藜芦醇是一种多酚类化合物,主要来源于葡萄、桑葚、虎杖等植物,具有抗氧化、抗炎、抗突变等生物学作用。有关研究表明白藜芦醇对人类许多疾病有着很好的辅助治疗作用,对酒精肝损伤及自身免疫性肝炎均具有一定的保护作用,但目前关于其对抗结核药物所致肝损伤方面的研究却鲜见报道。因此,本研究通过建立异烟肼联合利福平所致肝损伤大鼠模型,观察不同剂量白藜芦醇对肝损伤大鼠有无保护作用,初步观察其保护机制是否与抗氧化、抗炎、以及脂质代谢过程中关键基因和蛋白的表达有关。方法:实验动物选用60只SPF级雄性Wistar大鼠,体重180~220 g,按体重随机分为5组:正常对照组(Control)、模型组(Model)、白藜芦醇低剂量干预组(RLDG)、白藜芦醇中剂量干预组(RMDG)、白藜芦醇高剂量干预组(RHDG)。白藜芦醇低、中、高干预组每天分别空腹灌胃给予25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg白藜芦醇,对照组和模型组灌胃给予等剂量0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na),2h后模型组和白藜芦醇干预组每天灌胃给予异烟肼(100 mg/kg)+利福平(150 mg/kg),对照组给予等剂量溶剂灌胃,连续灌胃28天。末次灌胃12h后,称重,3%的戊巴比妥钠麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清、血浆,迅速摘取肝、脾、肾脏组织,计算脏器指数。HE染色观察大鼠肝脏组织病理学改变。全自动生化分析仪检测大鼠血清肝功能及脂质代谢指标。大鼠肝脏组织匀浆超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性采用黄嘌呤氧化酶法检测;丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量采用硫代巴比妥酸法测定;肝还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性采用二硫代硝基苯甲酸比色法测定;比色法检测过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF-α)、白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素4(Interleukin-4,IL-4)和细胞因子白介素-10((Interleukin-10,IL-10)的水平。实时定量PCR法检测大鼠PPAR-αm RNA和PPAR-γm RNA的表达水平。Western-blot法检测肝脏PPAR-α和PPAR-γ蛋白表达水平。结果:1.与正常对照组大鼠相比,模型组及白藜芦醇各剂量组大鼠的体重明显下降,肝脏指数明显升高。模型组大鼠血清总胆汁酸(TBA)、直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平显著升高(P<0.01)。白藜芦醇干预后可显著抑制血清ALT、AST、DBIL、TBIL水平的升高。HE染色结果显示,模型组大鼠出现严重的脂肪变性及炎性细胞浸润,白藜芦醇干预后脂肪变性、炎性细胞浸润均得到明显改善。2.脂质代谢水平检测结果显示,模型组大鼠血清CHOL、TG和肝脏CHOL水平显著升高,而白藜芦醇干预后抑制了异烟肼联合利福平引起的血清CHOL、TG水平的升高。与正常对照组比较,模型组的PPAR-α和PPAR-γm RNA以及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);白藜芦醇干预后明显上调了PPAR-α和PPAR-γm RNA以及蛋白表达水平。3.模型组的肝匀浆GSH水平有所下降,白藜芦醇低、高剂量组能显著升高GSH水平(P<0.05)。模型组的肝匀浆GSH-Px和CAT活性都显著下降,白藜芦醇中剂量组肝匀浆GSH-Px和CAT活性与模型组比较分别升高了20.6%和53.23%(P<0.05)。4.与正常对照组相比,模型组血清TNF-α水平明显升高(P<0.05),而IL-10水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,白藜芦醇低中高剂量组血清TNF-α水平均显著降低,分别下降18.7%、15.5%和28.6%(P<0.05);白藜芦醇中、高剂量组血清IL-10水平较模型组比较显著升高(P<0.05)。结论:1.白藜芦醇对异烟肼联合利福平所致肝损伤大鼠具有一定的保护作用。2.白藜芦醇的肝脏保护作用机制可能与?提高抗氧化酶活性;?减少促炎细胞因子TNF-α等释放;?调节脂质代谢水平;?上调PPAR-α、PPAR-γ蛋白表达有关。