【摘 要】
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目的:本研究通过配制不同比例的脂肪干细胞胶（SVF-gel）与结构脂肪（Coleman fat）,观察不同注射量的单点脂肪移植对移植术后脂肪体积保存率的影响,并观察其组织形态学改变,为提高脂肪移植的存活率提供科学依据。方法:（1）采用脂肪抽吸针提取成人腿部或下腹部脂肪组织,制备SVF-gel及Coleman fat,并采用流式细胞术检测SVF-gel中脂肪干细胞浓度;（2）取108只BALB/c雄
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目的:本研究通过配制不同比例的脂肪干细胞胶（SVF-gel）与结构脂肪（Coleman fat）,观察不同注射量的单点脂肪移植对移植术后脂肪体积保存率的影响,并观察其组织形态学改变,为提高脂肪移植的存活率提供科学依据。方法:（1）采用脂肪抽吸针提取成人腿部或下腹部脂肪组织,制备SVF-gel及Coleman fat,并采用流式细胞术检测SVF-gel中脂肪干细胞浓度;（2）取108只BALB/c雄性裸鼠构建脂肪移植模型。根据不同的单点脂肪注射量随机分为对照组（0.3ml注射组）与实验组（0.6ml注射组、1.0ml注射组）;每组再根据SVF-gel与Coleman fat的不同比例分为以下四个小组:a.单纯注射Coleman fat组（Col组）;b.SVF-gel与Coleman fat的比例为1:3（1SVF-gel+3Col组）;c.SVF-gel与Coleman fat的比例为1:1（1SVF-gel+1Col组）;d.单纯注射SVF-gel组（SVF-gel组）。（3）在术后第3天、7天、14天、30天、60天、90天采用排水法及micro-CT扫描检测脂肪移植术后脂肪移植物体积的变化;并采用HE染色、免疫组化法观察脂肪移植物的血管形成、脂肪再生及移植脂肪转归情况。结果:实验所采用的SVF-gel经流式细胞分析SVF细胞总数达到5.7.0×10^5个/ml达到4.0×10^5个/ml的标准。在移植术后第90天,0.6ml注射组中1SVF-gel+3Col组的大体形态优于对照组的1SVF-gel+3Col组,1.0ml注射组大体形态差。在移植术后第90天,0.6ml注射组的1SVFgel+3Col的术后脂肪移植物保存率明显高于0.3ml注射组（p=0.0187）。0.6ml注射组中的1SVFgel+3COL组的评分低于0.3ml注射组的1SVFgel+3COL组（p=0.044）脂肪生成:术后第30天,Coleman组的大部分脂肪移植都包含了perilipin-阴性区和大量的油囊肿。SVF-gel组脂肪移植物中的每个领域都出现了大量的脂肪细胞,1SVFgel+3COL、1SVFgel+1COL组的介于两组中间。血管生成:在术后早期,SVF-gel组、1SVFgel+3COL组与1SVFgel+1COL组CD31阳性的血管数量在第3天开始逐渐增加,在第14天达到高峰,30天开始衰退,30天后维持一个相对平稳的量。Coleman组血管密集程度14天才逐渐爬升,并维持一个较低的水平。移植物来源:脂肪移植术后第14天的各组大多数HLA阳性细胞出现在成熟脂肪细胞之间的细胞间隙中,并呈类似微血管的管腔结构。而Coleman组则呈大范围HLA阳性;1SVFgel+3COL、1SVFgel+1COL组则可见到少量散在存活的成熟脂肪细胞其细胞核与HLA阳性重叠。结论:本研究通过观察不同注射量的单点脂肪移植对术后脂肪移植物的大体观、存活率、组织形态学等的影响,发现0.6ml注射组的SVF-gel辅助Coleman fat移植相较于0.3ml注射组仍能保持一定保存率,且1SVFgel+3COL组最佳,因此单点大体积注射法是可行的。
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