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四条主要的开花诱导途径输出的信号最终由整合因子.LFY,FT和SOC1整合,激活花分生组织特性基因.LFY和AP1的表达,从而启动开花。WRKY蛋白质是植物中特有的一个转录调控因子大家族,根据WRKY结构域的数目和锌指结构的特征,可以将它们分为三大类。拟南芥WRKY25属于第Ⅰ类WRKY蛋白,参与植物生物和非生物胁迫反应。GUS染色和qRT-PCR的结果表明,WRKY25基因主要在拟南芥的根,叶和茎生叶中表达。过量表达WRKY25的转基因植株,在长光照下表现出比野生型拟南芥植株开花提前的表型。开花时,转基因植株比野生型植株要少0.5-2片莲座叶。通过RT-PCR检测开花时间相关基因Lfy,AP1,FT和FD的表达量,发现AP1基因的表达量在21d和27d大的WRKY25过量表达植株中上调。进一步分析,发现AP1启动子区存在几个可以满足WRKY蛋白质调控所需的W-box序列,由此推测WRKY25很可能通过调控AP1的表达,从而对开花起调控作用。
植物microRNAs(miRNAs)是一类由具有发夹结构的70-90个碱基的单链RNA前体,经Dicer-like酶加工后生成的20-25个碱基的小分子RNA。拟南芥中,miR774家族只有一个成员,其调控的5个靶基因,都编码F-box蛋白。F-box蛋白家族在植物生长发育、响应生物和非生物逆境过程中具有调控作用。通过农杆菌浸染获得过量表达miR774和启动子连接GUS基因的转基因植株。RT-PCR检测经SA,ABA,JA处理的野生型拟南芥中miR774前体的表达量,无法判断miR774受激素诱导的情况;接种PstDC3000和Botrytis后,突变体、野生型和过量表达植株的表型没有差异；对种子进行45℃热激处理,各中类型种子的萌发情况一样。本文进行的上述实验都未能弄清楚miR774的生物学功能。