高含量大豆皂苷制备和分离工艺研究

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本文研究了从大豆皂苷粗提液中分离纯化得到高纯度的大豆皂苷的方法与工艺,包括大豆皂苷粗提液的柱层析分离、结晶法精制两个主要过程。首先,以柱层析法对大豆皂苷粗提液进行初步分离,利用静态吸附法和动态吸附法考察了ZTC-1,HPD-100,HPD-300,HPD-600,AB-8,11#,12#,13#等树脂对大豆皂苷提取液分离纯化能力,优选出11#树脂为层析吸附剂,分别研究了11#树脂静态、动态吸附和解吸过程。静态吸附特性考察得出:pH在中性条件下树脂对大豆皂苷的吸附量最大;在考察的温度范围(30-70℃)内,发现树脂对大豆皂苷的吸附量随温度升高吸附量减小,30℃饱和吸附量最大,为303.51 mg/g。动态吸附特性的考察发现,柱温对吸附量的影响趋势与静态吸附时相同;初始上样浓度对动态吸附量影响较小,初始浓度升高,吸附量略有增大。在规格为Φ1.53 cm(ID)×27.2 cm的层析柱上优化柱层析工艺,得到优化的工艺条件为原料浓度6 mg/mL,上样量10 mg/mL树脂,上样温度60℃,原料上样后先用1.5 BV去离子水冲洗,再分别用1.5 BV 20%乙醇和2.5 BV 60%乙醇冲洗,收集60%醇洗液蒸干得柱层析产品。在上述条件下可将大豆皂苷的含量从原料中的3.0%提高至45%以上,大豆皂苷收率大于90%。考察了含水甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮等试剂对柱层析所得大豆皂苷粗品结晶的影响,得到优化的结晶条件:以40%乙醇为溶剂,大豆皂苷初始浓度108 mg/mL,冷却至20℃析晶24小时。可得含量大于96.0%的大豆皂苷,大豆皂苷收率大于50%。
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