血小板衍生生长因子在骨修复早期中的作用及相关作用机制的实验研究

来源 :第一军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:genius0728
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目的:将重组人血小板衍生生长因子(Platelet-derived growth factorAB,PDGF-AB)注入大鼠桡骨骨缺损模型,同体双侧对照,运用X线照片,组织学切片HE染色,免疫组织化学染色,分子原位杂交方法,从组织形态和细胞分子水平综合观察和分析PDGF对骨折愈合期间软骨骨痂发生、生长的刺激作用及其刺激信号的传导机制,试图为探讨PDGF在骨愈合中的作用及作用机制提供新的理论依据。方法:WAISTER大鼠30只,造成双侧上肢平均约3mm的桡骨骨缺损模型。将重组因子PDGF-AB分别于术后第1、3、5、7天分四次注入大鼠右侧桡骨骨缺损区内,左侧骨缺损区内注入0.9%生理盐水作为对照。分别于术后第1周、2周、4周摄双侧尺挠骨X线正位片,摄片后用骨密度仪测定和比较两组骨缺损区新生骨痂组织的骨矿物质密度,然后取骨痂组织,做成5份切片,分别进行HE染色、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组化、C-FOS免疫组化、C-JUN免疫组化和C-FOS原位杂交观察并对阳性结果作定量分析。结果:X线片和组织学观察显示:PDGF组样本骨缺损区内的新生软骨骨痂在生长的时间和数量上均优于生理盐水组,两组骨密度值结果比较:PDGF组样本中新生骨痂的骨密度值高于生理盐水组(P值小于0.05-0.01)。免疫组织化学观察见PCNA蛋白、C-FOS蛋白、C-JUN蛋白在软骨骨痂形成与转归中的表达规律有比较一致的相似性,且PDGF能刺激间充质细胞、软骨细胞合成这三种蛋白。术后1周,三种蛋白在PDGF组中间充质细胞内的表达均高于它们在生理盐水组中间充质细胞内的表达o值均小于0刀1人术后2周,三种蛋白在PDGF组中非肥大软骨细胞内的表达均高于它们在生理盐水组中非肥大软骨细胞内的表达o值小于0刀5-0刀1)。原位杂交观察见C-FOS基因在PDGF组中非肥大软骨细胞内的表达强于其在同期生理盐水组中非肥大软骨细胞内的表达。结论:PD*F能刺激动物体内间充质细胞和软骨细胞的增殖,加速软骨骨俪的形成,促进骨愈合。PDGF能诱导这两种细胞表达C-FOS与C-JUN,它或许能通过C-FOS/C-JUN蛋白来传递其生长作用信号,从而实现其刺激间充质细胞和软骨细胞增殖的目的。
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