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1)目的:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)已成为影响老年人生活质量的世界第二大神经退行性病变,其发病机制尚无定论。课题组前期已证明电针可能通过调控内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)相关信号通路蛋白及基因表达,达到阻止多巴胺能(Dopamine,DA)神经元破坏,从而延缓PD病程。但通过抑制凋亡来改善PD相关因子及症状的作用机制鲜少研究。故本实验选取CHOP诱导的凋亡途径进行研究,探索电针治疗PD的新靶点,为临床治疗提供试验及理论基础。2)方法:选取SPF级雄性SD大鼠60只,适应性喂养一周后,进行3次相关行为学检测,行为学表现无异常,按数字随机法将其分为3组:正常组(12只)、假手术组(15只)、模型组(33只)。采用颈背部皮下注射鱼藤酮乳化液复制PD模型(2mg/kg,溶解于二甲亚砜,浓度2mg/ml),1次/d,连续28d,正常组不予处理,假手术组给予同等体积未混合鱼藤酮粉末的二甲亚砜溶液,1次/d,连续28d。造模完成后,参考陈忻的行为学评分标准对大鼠行为学进行评分,将分数在2-8分范围内的模型大鼠视为成功复制,并从成功复制模型大鼠中抽取3只,进行免疫组织化学检测,评价其病理学改变。帕金森大鼠造模结束后,模型组随机保留24只,按数字随机法分为模型组、电针治疗组,每组12只。假手术组也随机保留12只。电针治疗组选取“风府”、“太冲”穴毫针针刺后接入电针,连续波,频率2Hz,强度1m A,每日1次,连续治疗14d。“风府”为固定用穴,“太冲”隔日左右交替。正常组、假手术组、模型组大鼠每日固定时间同样抓取固定,但不行电针治疗。参考陈忻的行为学评分标准,观察各组大鼠的外观形态学及行为学变化;运用旷场实验评定各组大鼠的自主运动能力变化及焦虑抑郁情绪变化;运用悬挂实验检测各组大鼠四肢肌力及脑内DA浓度变化;取大鼠中脑黑质部,各组取半数实验动物行左心室灌注生理盐水后换多聚甲醛灌注内固定脑组织,用免疫组织化学法检测各组实验动物中脑黑质致密部TH、α-syn的平均光密度变化;各组实验动物取剩余半数在冰面上迅速断头取脑,匀浆处理,用Western Blot检测各组大鼠中脑黑质CHOP、BAX、Bcl-2的蛋白表达变化,用实时荧光定量-PCR检测各组大鼠中脑黑质CHOP、BAX、Bcl-2的基因表达变化。3)结果:1.各组实验大鼠外观改变及行为学评分结果改变与正常组和假手术组相比,模型组大鼠的外观改变明显,行为学评分明显升高(P<0.01);与模型组相比电针组治疗大鼠的外观改变改善,行为学评分明显降低(P<0.01)。2.各组大鼠旷场实验实验大鼠主动运动各项数据变化与正常组和假手术组相比,模型组大鼠反应箱内主动运动的总路程、平均速度、运动总时间、穿越中央网格区域次数、垂直抬头运动次数明显降低,休息总时间明显升高(均P<0.01);与模型组相比,电针治疗组大鼠反应箱内主动运动的总路程、平均速度、运动总时间、穿越中央网格区域次数、垂直抬头运动次数明显升高,休息总时间明显降低(均P<0.01)。3.各组大鼠悬挂试验评分变化与正常组和假手术组相比,模型组大鼠悬挂试验分数明显降低(P<0.01);与模型组相比,电针治疗组大鼠悬挂试验分数明显升高(P<0.01)。4.各组实验大鼠中脑黑质TH的表达变化与正常组和假手术组相比,模型组大鼠中脑黑质致密部TH的平均光密度明显降低(P<0.01);与模型组相比,电针治疗组大鼠中脑黑质致密部TH的平均光密度明显升高(P<0.01)。5.各组实验大鼠中脑黑质α-syn的表达变化与正常组和假手术组相比,模型组大鼠中脑黑质α-syn的平均光密度明显升高(P<0.01);与模型组相比,电针治疗组大鼠中脑黑质α-syn的平均光密度明显降低(P<0.01)。6.各组实验大鼠中脑黑质CHOP、BAX、Bcl-2的蛋白表达变化与正常组和假手术组相比,模型组大鼠中脑黑质CHOP、BAX的蛋白表达水平明显升高,Bcl-2的蛋白表达水平明显降低(均P<0.01);与模型组相比,电针治疗组大鼠中脑黑质CHOP、BAX的蛋白表达水平明显降低,Bcl-2的蛋白表达水平明显升高(均P<0.01)。7.各组实验大鼠中脑黑质CHOP、BAX、Bcl-2的基因表达变化与正常组和假手术组相比,模型组大鼠中脑黑质CHOP、BAX的基因表达水平明显升高,Bcl-2的基因表达水平明显降低(均P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠中脑黑质CHOP、BAX的基因表达水平明显降低,Bcl-2的基因表达水平明显升高(均P<0.01)。4)结论:1.电针“风府、太冲”穴能够有效改善鱼PD病模型大鼠外观形态学和多种类PD异常行为。2.电针能够降解α-syn异常聚集,使PD模型大鼠中脑黑质中路易小体形成减少,保护DA能神经元。3.电针干预PD病模型大鼠的作用机制可能是电针能够阻止或延缓启动CHOP诱导的凋亡信号通路,降低ERS受到的伤害,保护DA能神经元免于大量损伤,抑制细胞凋亡通路,从而达到阻止或延缓PD的进展性病程的目的。