人心肌肌球蛋白和其重链的研制、特性鉴定及初步应用

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bojielinlinbojiebjbj
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评价心肌状况主要是心肌显像,而抗人心肌肌球蛋白重链(human cardiac myosin heavy chain,HCMHC)抗体被认为是最有前途的显像剂.关于肌球蛋白的研制长期以来国内外许多学者从事着这方面的研究工作,并且已提出一些方法,但主要是集中于动物心肌肌球蛋白的提取.我们在分析、比较和归纳这些方法的基础上,以Murakami U的猪心肌肌球蛋白提取方法为主要参考文献,吸收其他作者的优点,并做了较大改进,提出一个有效、简捷的HCM提取方法.结合前人的研究,改进方法,成功提取了HCM,并由HCM制备了HCMHC.对提取终产品和提取过程中的留样进行了蛋白浓度测定、SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、酶活力测定及游离巯基的测定等特性鉴定.用HCMHC免疫了BALB/C小鼠,用ELISA方法进行了血清抗体效价测定,证明提取物有较强的免疫原性.并利用经典的细胞融合技术进行了抗HCMHC阳性杂交瘤细胞株制备的初步实验.后继实验表明制备的HCMHC具有良好的免疫学活性.
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