结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠颌下腺细胞生物学行为影响的实验研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zy205806
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目的:  探讨不同质量浓度结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对SD大鼠颌下腺细胞(Rat submandibular gland cells RSGCs)的增殖、分泌生物学行为的影响,并找出最佳浓度,培养出大量大鼠颌下腺细胞。  方法:  应用体外组织块法原代培养SD大鼠的颌下腺细胞,免疫组织化学方法进行细胞来源鉴定,传代。将浓度分别为5μg/L、10μg/L、20μg/L的结缔组织生长因子分别加入到浓度为2.0×104/ml的第2代颌下腺细胞培养液中体外培养,作为实验组;同时将不含结缔组织生长因子的浓度为2.0×104/ml的第2代颌下腺细胞于培养液中直接培养,作为对照组。观测颌下腺细胞增殖情况,培养72小时后,分别取用第1d,2d,3d,5d,7d的培养液,用MTT法分别观测各组不同浓度的实验组及对照组中颌下腺细胞的增殖情况,绘制细胞增殖曲线;测定1d、2d、3d、5d、7d培养复合物上清液中淀粉酶含量,检测实验组和对照组的大鼠颌下腺细胞的分泌功能。应用SPSS for windows 13.0统计分析软件对结果进行方差分析,检验水准α=0.05,P<0.05认为有统计学差异。  结果:  将含有不同浓度的结缔组织生长因子与大鼠颌下腺细胞培养液及不含结缔组织生长因子的大鼠颌下腺细胞培养液进行MTT法细胞增殖检测,接种后1d,实验组与对照组颌下腺细胞数量大体相当,2d时,实验组比对照组颌下腺细胞数量略多,但实验结果无统计学差异(P>0.05),接种后3d-5d,实验组颌下腺细胞的数量优于对照组,实验结果有统计学差异(P<0.05),接种后7d时,实验组颌下腺细胞数量明显优于对照组,结果有统计学差异(P<0.01),而在各不同的浓度下,10μg/L浓度的结缔组织生长因子在3d和5d的结果中颌下腺细胞数量增长最多,颌下腺细胞增殖情况明显优于其他实验组;同时颌下腺细胞的分泌情况与颌下腺细胞增殖情况几乎一致。  结论:  结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠颌下腺细胞的增殖、淀粉酶分泌有促进作用;同时浓度为10μg/L的结缔组织生长因子对大鼠颌下腺细胞的增殖、淀粉酶分泌作用优于浓度分别为5μg/L、20μg/L的结缔组织生长因子。
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