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本文首次采用分子生物学方法对内蒙古园蛛属(Araneus)9种蜘蛛的线粒体12s rRNA基因部分序列进行了测定,并以网上下载的园蛛科艾蛛属的突尾艾蛛(Cyclosa conica)及自测的星豹蛛(Pardosa astrigera)作为外类群进行对比,应用Mega4.0软件进行分析建树,获得如下实验结果:
1.用引物12St-L-14503(5-GGTGGCATTTTATTTTATTAGAGC-3)与12Sbi-H-14214(5-AAGAGCGACGGGCGGGCGATGTGT-3)进行PCR扩增和测序,电泳后得到300bp左右的条带。
2.测序所得园蛛属9种蜘蛛12s rRNA基因序列平均长度为275bp,平均碱基组成分别为:A∶37.9%、T∶37.2%、C∶12.6%、G:12.3%,A、T含量为明显高于G、C含量。
3.对所测序列进行比对分析后,序列中简约信息位点227个,变异位点是48个,变异率为17.5%,说明12s rRNA基因序列是保守序列,适用于物种的系统发育研究。
4.不同序列间的转换加颠换值最高为47,最低为5,颠换的发生主要以T-A,A-T为主,转换主要以C-T,T-C为主。
5.不同方法构建的系统树基本一致,9个种分为3支:即花岗园蛛与类花岗园蛛及肥胖园蛛为一支,北疆园蛛与十字园蛛为一支,裂突园蛛、鞑靼园蛛、杂黑斑园蛛、大腹园蛛四个种为一支。
6.在蜘蛛目中属间遗传多样性研究中,12s rRNA基因可以作为良好的分子标记予以应用。
7.根据所测裂突园蛛的序列信息,其应归属于园蛛属而非新园蛛属。