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小叶杜鹃(Rhododendron Parvifolium Adoms)为杜鹃花科杜鹃花属植物,是多年生常绿小灌木。小叶杜鹃为长白山优良野生花卉,由于数量较稀少,是国家三类重点保护植物。为保护及开发小叶杜鹃资源,本研究通过对外植体的灭菌及植入、启动培养、继代增殖、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、愈伤组织分化、壮苗、生根培养及炼苗移栽等的研究,以工厂化育苗为目的,寻找合适的培养基及培养条件,希望通过组织培养的方法为快速繁殖小叶杜鹃提供合适的途径,并且可以为以后的转基因、细胞融合等深入研究提供技术支持。通过研究,获得以下研究结果:1.小叶杜鹃组织培养的适宜环境为:温度25±2℃,光照24h/D,光照强度2000Ix,pH值为5.0-5.5。当PH为5.0时,组培苗的增高生长较快,利于增殖培养;当PH为5.5时,组培苗生长较为健壮,利于壮苗培养。2.小叶杜鹃外植体的采集时间:以7月份采集的当年生嫩梢为外植体最好;茎段要优于茎尖,茎段启动快,启动率最高,污染率底。3.外植体灭菌方法:以0.1%升汞进行灭菌,时间设置为2.5min,加入1-2滴吐温可以增强灭菌效果。4.启动培养:以Read+ZT 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L为培养基,PH为5.0,加入蔗糖30g/L,琼脂条12g/L,此时诱导率最高,长势最佳,培养40天,外植体的启动率达62.96%。5.增殖培养:以Read+ZT 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L培养基增殖效果较好,小叶杜鹃的平均增殖倍数为5,从茎段基部分化出丛生芽,增殖苗生长健壮,整体长势较佳。增强光照强度,设定昼夜温差以及适当增大培养基营养元素的浓度,利于培育健壮的增殖苗。6.壮苗培养:以Read +NAA 0.2mg/L+AC2g/L培养基的壮苗效果较好,叶大色绿,长势健壮,并且该培养基具有促使生根的作用。7.生根培养:Read +NAA 0.2mg/L+AC2g/L培养基的生根效果较好,生根率达95.23%,并且组培苗生根效果良好、整体长势较一致,炼苗移栽时成活率也较高。在此培养基上,小叶杜鹃生长速度较快,长势整齐健壮,可以剪切成茎段进行增殖,增殖倍数为4。以茎段的方式进行增殖,不容易发生变异,并且此培养基同时具有壮苗、生根以及增殖的效果,可以将组织培养过程简化。8.愈伤组织的培养:在Read +2,4-D1.5mg/L+NAA 0.1mg/L培养基上,对无菌苗进行愈伤组织的诱导效果较好;叶片的诱导率要高于茎尖;Read +ZT 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L培养基较适合小叶杜鹃愈伤组织的增殖培养;Read +ZT0.8mg/L+NAA 0.08mg/L培养基较适合小叶杜鹃愈伤组织的分化培养。9.炼苗移栽:小叶杜鹃炼苗移栽应选择在温湿度都比较适宜的春秋季节进行,春季移栽成活率要高于秋季;在园土:草炭:腐殖土=1:1:1的基质上组培苗成活率最高;移栽环境以半光照较好。10.扦插生根:扦插生根培养在半光照环境较好;以苔藓为扦插基质的生根率较好;进行生根处理的要较未处理过的好。