如今,恶性肿瘤已成为威胁人类生命健康的重要元凶。而好发于青少年的骨肉瘤,由于其恶性程度高,早期转移率高,致死致残率高,给社会和家庭都造成了沉重的心理压力和经济负担。随着化疗方案的不断改进完善,以及人工关节材料技术的不断进步,骨肉瘤的治疗手段取得了比较快的发展,患者的保肢率、5年生存率不断提高。但是,目前骨肉瘤的治疗方案仍存在不少难以克服的局限性。对于存在化疗药物抵抗、出现复发或转移等情况的骨肉瘤患者,生存率仍然较低。最近的5~10年,骨肉瘤的治疗已遇到了“瓶颈”。寻找肿瘤的靶点,探索分子靶向治疗的方向,将成为骨肉瘤治疗新的突破口。目前,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在肿瘤中的作用正在被逐渐地探索和发现。许多研究者在不同肿瘤中发现了许多lncRNA存在异常表达,并且这些lncRNA的表达程度与肿瘤的分期、远期预后等密切相关。在肿瘤中改变一些lncRNA的表达,可以改变肿瘤的侵袭性、迁移性和转移性。这些研究结果提示lncRNA可能成为肿瘤治疗的新靶点。MALAT-1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,肺腺癌转移相关转录本-1)目前已被证实在多种肿瘤的增殖、侵袭、转移中发挥作用。但是目前关于MALAT-1在骨肉瘤中表达情况的研究较少,且都存在各自的局限性。本研究旨在进一步探讨MALAT-1在骨肉瘤中的表达及其作用,为骨肉瘤的病情评估寻找新指标,以及为将来可能出现的基因治疗和分子靶向治疗提供依据和参考。一方面,我们通过裸鼠植瘤试验,观察MALAT-1表达对骨肉瘤生长的影响。另一方面,我们收集了科室收治的骨肉瘤患者的肿瘤标本和癌旁正常组织标本。通过对比同一患者的骨肉瘤组织和癌旁正常组织中MALAT-1的表达情况,并与该患者的临床资料相结合,探索MALAT-1在骨肉瘤中的表达情况及其与临床特点之间的关系。第一部分:MALAT-1表达对裸鼠体内骨肉瘤生长的影响。在第一部分的研究中,我们使用慢病毒转染的方法,培养稳转录的MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤H2OS细胞系。将12只裸鼠平均分为实验组和对照组,实验组裸鼠背部皮下植入MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤H2OS细胞系,对照组裸鼠背部皮下植入空载慢病毒处理的、MALAT-1表达基本正常的骨肉瘤H2OS细胞系。植瘤后,观察两组裸鼠移植瘤的生长情况。处死裸鼠后,比较两组裸鼠的移植瘤在体积、重量、HE染色、免疫组化之间的差异。结果显示,实验组裸鼠皮下的肿瘤生长更慢,相同生长时间内肿瘤的体积更小、重量更轻。HE染色和免疫组化结果显示,实验组裸鼠生长的肿瘤中,基质成分增多,细胞密集程度降低,PCNA表达程度降低。这一结果提示MALAT-1表达降低可以抑制骨肉瘤的生长,促进骨肉瘤细胞的凋亡,降低骨肉瘤细胞的侵袭性。从病理学特点方面探讨MALAT-1表达对实体骨肉瘤生长影响的研究目前尚无文献报道。第二部分:MALAT-1表达与骨肉瘤患者临床特征相关性的研究。在第二部分研究中,我们收集同一患者的骨肉瘤标本和相邻癌旁正常组织标本,分别测定MALAT-1的表达情况,并将测定结果与患者的年龄、性别、肿瘤部位、碱性磷酸酶、肿瘤分期、取材时机(活检或根治性手术)、化疗情况等相对照,探讨MALAT-1表达与患者临床特点之间的关系。这是目前为止较为详细的MALAT-1表达情况与临床特点相关性的研究。结果显示,MALAT-1表达与骨肉瘤患者的临床分期、取材前是否经历新辅助化疗有关,ⅡB期的骨肉瘤与ⅡA期的骨肉瘤相比,更容易出现MALAT-1表达高于癌旁正常组织的情况。新辅助化疗后的骨肉瘤标本中,MALAT-1的表达往往高于癌旁正常组织。未接受化疗的骨肉瘤标本中,MALAT-1的表达常常低于癌旁正常组织。这一结果显示,与其他肿瘤相比,骨肉瘤标本中MALAT-1表达情况可能存在特殊性。由于骨肉瘤特殊的治疗过程,临床特征多变,因此关于MALAT-1用于骨肉瘤的病情评估和分子靶向治疗的效果,还需要更大样本、更深入的研究。