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背景:T细胞在器官移植后排斥反应中起中心作用。共刺激信号是T细胞完全激活的必要条件。目前研究结果表明B7-1/B7-2—CD28/CTLA4共刺激信号通路在激发初始T细胞活化中占主导地位,而ICOS—ICOSL(B7RP-1)信号通路在参与调节记忆性和效应性T细胞功能、维持外周耐受等方面起重要作用。因而在本实验中,我们通过携带ICOS、CTLA4Ig胞外区基因的腺病毒感染供体大鼠肾脏,以下调这两条共刺激信号通路,并观察是否能减轻移植后急性排斥反应,以及是否能显著延长移植肾的存活。目的:通过腺病毒载体将ICOS、CTLA4Ig胞外区感染供体大鼠肾脏,观察下调B7-1/B7-2—CD28/CTLA4、ICOS—B7RP-1这两条共刺激信号通路是否能减轻移植后急性排斥反应,以及是否能显著延长移植肾的存活。方法:用基因工程的方法将ICOS胞外区的cDNA片段插入腺病毒载体,构建带ICOS胞外区基因的腺病毒基因组重组质粒,转染293包装细胞,筛选ICOS胞外区高效表达的重组腺病毒;通过Western Blot检测重组腺病毒感染后的293细胞上清中的ICOS胞外区蛋白;通过免疫组化检测重组腺病毒感染三天后的3T3细胞中ICOS胞外区蛋白表达情况;通过混合淋巴细胞反应(MLR)检测ICOS胞外区蛋白的生物学功能;并应用大鼠肾移植模型评价携带CTLA4Ig、ICOS胞外区基因腺病毒的作用。结果:(i)成功构建了含有ICOS胞外区 cDNA片段的重组腺病毒载体;(ii) 该重组腺病毒能成功地使靶细胞表达ICOS胞外区蛋白,并且具有相应的生物学功能。(iii)重组后腺病毒能有效感染供体大鼠肾脏。(iv) 同时使用分别携带CTLA4Ig、ICOS胞外区基因腺病毒感染供体大鼠肾脏,能有效减轻移植后急性排斥反应,以及能显著延长移植肾的存活。结论:在本研究中,成功构建了表达ICOS胞外区的重组腺病毒载体;同时使用分别携带CTLA4Ig、ICOS胞外区基因腺病毒感染供体大鼠肾脏,能有效减轻移植后急性排斥反应,以及能显著延长移植肾的存活。