乳酸菌Ⅱ型拓扑异构酶基因突变与耐氟喹诺酮类药物的相关性

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本研究以内蒙古达尔罕茂明安联合旗牧区和四子王旗牧区的自然发酵乳制品中分离的18株乳酸菌为研究对象,采用试管二倍稀释法测定了试验菌株的最小抑菌浓度(MIC),发现18株乳酸菌对左氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星具有不同程度的耐药性,耐药率均为88.9%;其中,对抗菌药左氧氟沙星和环丙沙星均为1株敏感,1株中介,其余菌株为耐药;对抗菌药诺氟沙星2株为中介,其余菌株为耐药。筛选6株对3种抗菌药耐药及1株对3种抗菌药为中介的菌株,进行形态学鉴定、生理生化鉴定、16S rRNA序列分析,结果表明:3株为屎肠球菌Enterococcus faecium),2株为坚强肠球菌(Enterococcus durans),2株为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)。试验通过对标准菌株和耐药菌株的Ⅱ型拓扑异构酶gyrA、gyrB、parC基因进行PCR扩增、测序、比对得出:耐药菌株的gyrA和parC基因分别有83个和127个位点发生氨基酸突变,证实这些氨基酸突变与菌株耐氟喹诺酮类药物有关;gyrB基因中引入了终止密码子,出现无义突变,可能是菌株耐药的原因之一。
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