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本研究包括两个部分,分别用于研究不同精粗比日粮对育肥前期延边黄牛消化代谢和瘤胃微生物多样性的影响。实验一:研究饲喂不同精粗比日粮对延边黄牛养分表观消化率、瘤胃发酵的影响。选择4头年龄、体重相近(300±15)kg的安装有永久性瘤胃瘘管的延边黄牛,采用4×4拉丁方设计,分别饲喂精粗比为30:70、40:60、60:40和70:30的育肥前期基础日粮。试验分为4个阶段,每阶段20d,其中预试期15d,正试期5d收集样品。结果表明:1)干物质、有机物和粗蛋白采食量随着日粮精料水平的提高而线性增加(P<0.01),而中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维采食量随日粮精料水平的提高而线性降低(P<0.01);随着精粗比的提高,干物质表观消化率显著升高(P<0.05),粗蛋白表观消化率显著降低(P<0.05)。有机物、酸性洗涤纤维表观消化率随着日粮精料水平的提高差异不显著(P>0.05)。2)瘤胃pH,60:40组显著低于其他组(P<0.05),且瘤胃平均pH随着精粗比的提高显著降低(P=0.01);瘤胃氨态氮浓度,70:30组显著高于其他组(P<0.05),瘤胃总挥发性脂肪酸浓度各组间差异显著(P<0.05);乙酸浓度6h时,各组间差异显著(P<0.01),随着精粗比的提高呈线性降低的趋势(P<0.01)。丙酸浓度,各组间差异显著(P<0.05),随着精粗比的提高呈线性降低的趋势(P=0.10)。6h时乙酸/丙酸差异显著(P<0.05)。总嘌呤衍生物排出量和尿囊素有随着精粗比的提高呈线升高的趋势(P<0,05或P<0.01)。由此可知,提高日粮精料比例能增加实验牛干物质、有机物和粗蛋白采食量,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维采食量则相应减少;有效提高了干物质表观消化率;降低了瘤胃平均pH,提高了瘤胃氨态氮浓度,增加了瘤胃可利用氮含量。实验二:研究饲喂不同精粗比日粮对育肥前期延边黄牛瘤胃微生物多样性的影响。选用3头健康的年龄、体重相近(300±15)kg的安装有永久性瘤胃瘘管的延边黄牛,采用3×4拉丁方设计,分别饲喂精粗比为30:70、40:60、60:40和70.:30的育肥前期基础日粮。试验分为4个阶段,每阶段18d,其中预试期15d,正试期3d收集瘤胃液样品。利用冻融法获得瘤胃微生物基因组DNA,通过PCR获得细菌16srDNA V3片段,并进行变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient (?) electrophoresis)。通过对DGGE图谱的分析,比较各处理组间细菌种群的高度和相似性。通过荧光定量PCR,比较各处理组间对应微生物的相对表达量。结果表明:1)瘤胃微生物的群落结构,图谱主要分为两大簇,将中精料水平处理组(4:6、6:4)与高(7:3)、低精料水平(3:7)处理组区分开来,条带的相似度仅为45%。说明日粮精粗比对瘤胃微生物的群落结构有一定影响,但低精料水平日粮组(3:7)和高精料水平日粮组(7:3)的微生物群落结构差异不大。2)与精粗比3:7日粮相比,4:6、6:4和7:3处理组的条带数减少了,各处理组间差异显著(P<0.05)。香农多样性指数3:7组与6:4组和7:3组差异显著(P<0.05)。6:4组与7:3组差异显著(P<0.05)。3:7组和4:6组差异不显著(P>0.05)。3)溶纤维丁酸弧菌(B. fibrisol vens)的相对表达量个处理组间差异显著(P<0.05)。与精粗比3:7相比,溶纤维丁酸弧菌的相对表达量分别降低了0.2,0.33和0.29倍。总细菌,白色瘤胃球菌(Ruminobac ter albus)和黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)的相对表达量各个处理组间差异不显著(P>0.05)。与精粗比3:7相比,产甲烷菌mcr-A的相对表达量分别提高了0.2,0.78和0.74倍(P<0.05)。说明了,日粮精粗比对瘤胃微生物的群落结构和多样性有较大的影响。日粮精粗比的提高降低了延边黄牛瘤胃中溶纤维丁酸弧菌(B. fibrisolvens)的相对表达量,提高了产甲烷菌mcr-A的相对表达量。而对总细菌、白色瘤胃球菌(Ruminobacter albus)和黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)的相对表达量没有影响。