DNA基银和铜银纳米簇性质研究及对H2O2和葡萄糖的检测

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近年来,采用模板法合成贵金属纳米团簇发展迅速,尤其是以DNA为模板合成的贵金属纳米团簇因其水溶性好、光学性质良好、和生物相容性高等诸多优点从而作为一种新兴纳米材料广泛应用于生物医药、催化和传感等领域。本文设计了十条DNA序列,包括5条富C序列即c-Kit、c-Myc、c-PS、c-HTG和c-Bcl,以及分别在其3’端添加富G序列的另外5条序列即c-Kit-TBA、c-Myc-TBA、c-PS-TBA、c-HTG-TBA和c-Bcl-TBA,并在不同pH条件下以上述DNA序列为模板分别合成了银纳米簇(Ag NCs)和铜银纳米簇(Cu/Ag NCs)。通过荧光光谱,电子能谱,高分辨透射电子显微镜(HRTEM)等手段对团簇进行表征,利用其过氧化物酶活性实现了对过氧化氢以及葡萄糖的检测。本文主要研究工作如下:(1)首先以上述序列为模板在酸性和中性不同缓冲环境中合成了 Ag NCs和Cu/Ag NCs,从荧光光谱可以看出,DNA模板序列,不同的缓冲环境以及Cu2+的加入都对合成的纳米团簇光学性质有着显著影响。中性和酸性条件下分别有利于Ag NCs和Cu/Ag NCs的合成,加入Cu2+合成的c-Myc-TBA-Cu/Ag NCs无论在酸性或中性环境中都表现出较强的绿色荧光发射,尤其在酸性条件下荧光增强加快,稳定性更好,有利于后续应用。(2)将上述酸性条件下荧光强度大,稳定性好的c-Myc-TBA-Cu/Ag NCs采用HRTEM,XPS,AES等手段进行表征,发现其尺寸小且均匀,无聚集现象发生。通过研究对比发现,在富C单链DNA(c-Myc)末端连接一段富G序列,及有Cu2+存在下合成的纳米团簇,不仅能显著增强荧光强度和稳定性,而且过氧化物酶活性也大大增强。推测是在DNA中的G碱基和团簇中的Cu2+与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺的氨基共同作用下来实现的。利用较强的过氧化物酶活性,实现了对过氧化氢和葡萄糖的快速比色检测。该检测方法的线性范围分别为0.1 mM-1 mM和0.1 mM-0.7 mM,对应的检出限为7.42 μM和9.38 μM,能够应用于胎牛血清中葡萄糖的检测并得到良好的回收率,证明其实际应用潜力巨大。
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