硒是一种生物体必需的微量元素,作为一些抗氧化酶(谷胱甘肽过氧化物酶等)和硒—β蛋白的重要组成成分,硒具有抗氧化、抗衰老、增强机体免疫力、防癌抗癌等作用,缺硒还会直接影响心、眼、骨骼、前列腺等重要的器官功能。据不完全统计,全世界约有42个国家和地区缺硒,中国营养学会推荐的成人硒摄入新标准为每日50-250微克,而中国有约三分之二地区低于这一标准。天然食品中的硒含量-般较低,通常很满足机体需求量,通过硒补充剂补硒成为一种趋势,硒补充剂分为无机硒补充剂和有机硒补充剂两大类,无机硒补充剂毒性比较大,生物效价比较低,有机硒补充剂则毒性较小,生物效价较高。通过植物和微生物合成有机硒补充剂越来越受到人们的重视,近年来对此方面的研究也越来越多。酵母是一种常见的发酵菌,其安全、发酵周期短、合成效率高、工艺简单,是优良的发酵载体。酵母多糖是酵母细胞壁的组成之一,具有增强巨噬细胞活性,抗肿瘤、提高免疫力等功能,与硒功能相似,作用协同。而酵母多糖为初级代谢产物,酵母硒为次级代谢产物,两者共同发酵过程拮抗较少,因而共同发酵是有意义的。故本实验采取酵母为发酵载体进行富硒、酵母多糖发酵。本研究以实验室保藏的3株酵母菌株为出发株,在高硒浓度培养基中进行(150mg/L)耐受性发酵培养实验,随后反复多次进行UV(紫外)-DES(硫酸二乙酯)复合诱变育种,最终筛选出了2株表型最好的菌株,并对其中一株进行发酵试验,测定其富硒能力和多糖产率,以验证选育效果,结果显示,选育株富硒能力分别提高了38.4%和50.7%,粗多糖产量分别提高了11.7%和15.2%,硒浓度80mg/L发酵生物量也有所提升,证明了选育有效。最后运用RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)技术,在分子生物学水平进行初步突变验证。选育出优势菌株后,通过单因素摇瓶实验确定选育株最佳发酵条件：装样量90mL/250mL,接种量3%,初始pH为自然pH(6.0左右),发酵温度为30℃,转速为150r/min,发酵周期30h,硒添加量30mg/L。根据相关文献报道(柳乐,2005)和初步试验,确定培养基配方为：麦芽浸粉、酵母浸粉、硫酸铵、磷酸二氢钾。然后通过Plackett-Burman设计实验和正交设计实验确定优化培养基配方组成为：麦芽浸粉3%,酵母浸粉0.4%,硫酸铵0.2%,磷酸二氢钾0.3%。在此优化条件下,摇瓶发酵培养测得菌液OD值达到0.542,总硒含量984.3μg/g。最后进行5L发酵罐仿工业化扩大发酵试验,菌体生物量为11.5g/L,含硒量952.2μg/g,多粗糖提取率为11.4%。