AtHGO/OsHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建转化及表达分析

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:c_zhang08
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HGO是编码酪氨酸降解途径中尿黑酸1,2双加氧酶的基因。在前期研究中发现若酪氨酸降解途径中编码延胡索酰乙酰乙酸酶(fumarylacetoacetate hydrolase,FAH)的基因突变会导致拟南芥sscd1(short-day sensitive cell death1)突变体在短日照下发生细胞死亡,若将hgo突变体和sscd1突变体进行杂交,得到的拟南芥sscd1hgo双突变体在短日照下细胞死亡的表型会被抑制。通过外源添加酪氨酸发现低浓度酪氨酸对拟南芥幼苗的生长具有促进作用,而高浓度酪氨酸将会抑制其幼苗的生长。水稻和拟南芥分别为单子叶和双子叶的模式植物,且水稻OsHGO基因与拟南芥At HGO基因具有类似的功能。为了探讨HGO基因在植物组织中的表达特征,本论文做了以下研究:1、AtHGO和OsHGO基因启动子序列的克隆。通过PCR和测序检测,这两个基因的启动子序列被完整且正确的克隆。2、分别构建AtHGO和OsHGO基因启动子的GUS融合表达载体。分别用克隆的AtHGO和OsHGO基因启动子序列与含GUS基因的pC1301载体进行重组来实现其与GUS基因的融合。3、将重组载体通过采用农杆菌介导的浸花法转入拟南芥野生型Col-0、sscd1和hgo突变体,并对其进行GUS染色分析。结果显示,启动子成功启动GUS基因的表达,且AtHGO和OsHGO在拟南芥野生型Col-0、sscd1和hgo突变体中表达程度或表达部位有所不同。
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