研究目的：许多研究表明缺氧诱导因子-1(HIF-1)是缺氧应答中起重要作用的转因子。血管内皮生长因子(VEGF)是促进血管生长关键因子。二者在心肌缺血疾病、脑缺血疾病等缺血、缺氧性疾病的研究中存在高表达,在这些疾病的病理生理过程中起重要作用。肺栓塞(PE)导致肺损伤,肺氧合功能障碍,从而引起缺氧。在急性肺血栓栓塞症中,HIF-1、VEGF是否有高表达?二者是否存在相关机制?国内未见明确报道。本实验采用改良右心导管法制备自体血栓肺栓塞大鼠模型,研究大鼠肺栓塞肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1(HIF-1)的表达变化,探讨PTE后与VEGF. HIF-1α相关性及可能的作用机制。研究方法：选取Wistar成年大鼠40只,体重250-300g,雄性。随机分成5组,分别为正常对照组、栓塞后1h组、栓塞后6h组、栓塞后12h组、栓塞后24h组,每组8只。一建立大鼠急性肺血栓栓塞模型无菌条件下颈动脉取血制成栓子。沿前正中线切口,右颈外静脉插管注入已制备的血栓。分别于是1、6、12、24h开胸取肺组织。正常对照组注于相应时间点注入同量的生理盐水,24h开胸取肺组织。固定、加蜡包埋。常规冰箱冷藏。二免疫组织化学法检测肺组织HIF-1α、VEGF表达变化切片,常规脱腊至水H2O2阻断,5%BSA血清封闭,加一抗后4℃过夜,次日依次加生物素标记二抗和SABC,经DAB显色,苏木素复染,透明,封片,显微镜下观察显色结果。结果判定HIF-1α阳性表达为细胞核或胞浆内出现棕黄色颗粒,按染色强度与阳性细胞百分比的乘积分为(-)-(+++)。VEGF阳性细胞的判定参照Takahashi等的方法将VEGF表达分为(-)-(+++)共4级,以细胞浆或胞膜呈棕黄色者为阳性。统计学处理采用SPSS13.0统计软件分析, HIF-1α和VEGF表达呈等级分布,比较采用等级秩和检验,HIF-1α和VEGF间相关性采用Spearman相关分析。研究结果：1、所有栓塞组在注入血栓栓子后,大鼠立刻出现呼吸急促,RR=35±5次／min,心率加快,HR=515±30次／min；口唇及趾端出现明显紫绀；活动明显减少,多为俯卧位；食欲下降,24h内未主动进食。而对照组注入生理盐水后呼吸平稳,RR=20±3次／min,心率正常,HR=375±10次／min；未出现紫绀；活动如常；主动进食。2、栓塞组肺组织HE染色显示与支气管伴行的肺动脉及其他小血管内存在大小不同的栓子,肺栓塞后肺组织呈现弥漫性病变,并且随栓塞时间的延长病理改变逐渐加重。对照组24小时后肺组织未见栓塞,结构正常。3、对照组大鼠肺组织内无HIF-1α表达。栓塞组不同时间点大鼠肺组织细胞的胞核、胞浆内均出现HIF-1α表达,阳性率为100%,表达强度在“++”-“+++”之间,且随时间延长,高表达强度增加,12h达顶点,直至24h保持平稳。HIF-1的表达在栓塞不同时间组组别间的差异有统计学意义(H=17.20,P=0.016<0.05)。对照组大鼠肺组织细胞、血管内皮细胞中VEGF阳性表达率为37.5%,但显色浅,表达强度以“+”为主；栓塞组大鼠肺组织VEGF表达阳性率增加,随时间延长而增加,表达强度以1 2 h为高,多为“++”、“+++”,直至24h保持平稳。VEGF在栓塞不同时间组组别间表达的差异有统计学意义(H=1 7.57,P=0.004<0.05)。4、通过对栓塞后不同时间点大鼠肺组织中HIF-1α和VEGF表达的动态观察,发现两者表达强度的增减有相同的趋势,呈正相关关系(r=0.600,P<0.05)。结论：1.本实验以成年Wistar大鼠,通过改良右心导管法成功制备肺栓塞动物模型,具有栓塞率高、可控制性强、存活性好的优点,是肺血栓栓塞基础研究的理想动物模型。2. HIF-1α、VEGF在大鼠PTE肺组织中均呈高表达,且两者呈正相关性。提示HIF-1α作为上游基因,可能调节其下游基因VEGF的表达增强,证实了HIF-1α在肺栓塞的病理生理过程起着“启动”作用,对临床以HIF-1α为靶基因治疗肺栓塞提供了新思路。