重组人可溶性PDGFRβ/Fc在昆虫细胞中的表达

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ssxjj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)具有诱导肿瘤中淋巴管生成和促进肿瘤淋巴转移的功能,是潜在的治疗肿瘤分子靶标。可溶性血小板源性生长因子受体(sPDGFR)可与细胞膜表面的PDGFR竞争性结合PDGF,从而阻断PDGF的生物学效应,有望用于肿瘤的治疗。由于天然的sPDGFR存在着半衰期短、与配体结合能力低等缺点,本研究利用基因工程技术,构建PDGFR的β链膜外区与人IgGFc片段的融合蛋白sPDGFRβ/Fc。该重组型可溶性受体作为一种新型的PDGF拮抗剂,具有很好的应用前景。 本研究采用Bac-to-Bac系统,构建重组质粒pFastbac-sPDGFRβ/Fc,转化感受态细胞DH10Bac,使目的基因与杆状病毒基因组DNA发生位点特异性重组,得到rBacmid-sPDGFRβ/Fc重组病毒DNA。该重组病毒DNA通过脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得了具有感染能力的重组病毒粒子。进一步将重组病毒粒子感染Sf9无血清细胞系,获得了目的蛋白sPDGFRβ/Fc的高表达,表达量为1mg/L。经protein A亲和层析,纯度达75%以上,MTT法检测表明sPDGFRβ/Fc具有抑制PDGF的刺激3T3细胞增殖的能力。此外,本研究还建立了Sf9的无血清悬浮培养系统,发现无论是贴壁还是悬浮培养,补加葡萄糖均可有效地促进细胞生长,提高细胞培养密度。 本研究利用杆状病毒表达载体系统(baculovirus expression vectors system BEVS)成功构建重组病毒,为大规模表达、纯化具有生物活性的PDGFRβ/Fc用于肿瘤的治疗奠定了基础。
其他文献
太多的人采用这种交通方式,地铁就不能发挥其应有的功能,造成设施的浪费;上海为提高公共交通的服务水平和公交的可靠度,正在实施推进公交专用道建设的交通政策,涉及到道路路权使用
文本自动摘要技术可以压缩文本中冗余的文本,且不影响文本中心内容,能方便用户快速了解文本包含的信息。在现实生活中具有很大的应用价值。例如:新闻专题中包含新闻内容;文本情感分析;自动问答等领域。自动摘要抽取流程划分为两个模块:第一部分,文本主题词抽取模块和第二部分的文本句子抽取模块。文本主题词抽取模块,传统的TF-IDF算法主要以词出现在文本中的频率度量词的重要性,未考虑词的语义和位置等有用信息,容易
【正】 近年来,工矿企业大力推行全面质量管理,取得了显著效果。但作为产品主渠道的物资业,尚不够重视产品质量管理,这种状况应引起足够重视。 一、产品质量影响因素的观念转
【正】 随着全国经济体制改革的滚滚洪流和石家庄市“撞击反射式”综合配套改革的深入发展,三年来,石家庄市在改革物资供应体制发展城市钢材市场方面进行了大胆地探索。现就
在默认设置下,iPhone会自动记录驾车路线,但必须是内置传感器的iPhone 6/6Plus才能记录骑行足迹。其实,即使是iPhone 4s,也可以“曲线”查看骑行足迹:  进入设置界面,依次选择“隐私/定位服务/系统服务/常去地点”,点击右侧的“>”按钮,点击“历史记录”右侧的“>”按钮(如图),在这里可以扣除驾车的记录,剩余的就是骑行的记录,可以根据时间查看骑行足迹,虽然比较粗糙,但还是有迹
一、叉车物流运输的特点及事故危害叉车物流运输的主要特点:一是流动性。叉车经常处于运行状态,是到处跑的机动设备。二是频繁性。厂内叉车运输作业较频繁,一年四季驾驶员几乎
关于品牌机和兼容机熟优熟劣的讨论从未中止过,在市场消费者的传统认知中,兼容机无疑在价格方面相对品牌机占有绝对优势
对于当今世界政要来说,他们的坐驾从外表上看未必要豪华,却一定要防弹,最起码车身能够经受住手榴弹、燃烧瓶,以及像AK-47这样的冲锋枪的袭击。车上玻璃的厚度最薄也须达到48毫米
一、越江桥隧现状及发展趋势黄浦江是上海市中心城内的自然阻隔,两岸越江通道现有南浦、杨浦、徐浦、卢浦四座大桥和延安路、打浦路、大连路、外环四条隧道.今年下半年复兴东
目的:探讨3.0T磁共振多b值弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)及表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)对早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)