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近年来,临床上出现不少藏獒犬细小病毒疫苗免疫失败的病例,其中一些患病犬,情况十分严重,且久治不愈最终导致死亡,这可能与细小病毒(CPV)抗原的不断变异有一定关系。用F81细胞从四川地区送检的3份肠炎藏獒犬病料中分离出2株细小病毒.通过试验我们发现该细小病毒能在F81细胞中增殖,产生的细胞病变有:肿胀、变圆、破碎和脱落等;经过形态学观察,该细小病毒粒子无囊膜,直径为20-24nm,呈立体对称,经理化学、生物学和分子病毒学等鉴定结果表明,分离毒株均能被5-IUDR抑制,并且耐酸,耐热,抗氯仿;这两株分离毒株均可凝集猪和猫的红细胞,但不能凝集狗、羊和兔的红细胞;用CPV特异性引物对所分离毒株进行PCR扩增,则能够顺利扩增出CPV特异性片段;进行HA试验,它们能抑制CPV特异性抗体;并且所分离病毒毒株能够感染犬。综合以上结果表明,这2株病毒均为CPV。
对所分离的CPV进行基因型分析。用PCR方法扩增了1株犬细小病毒(CPV)VP2全基因片段,通过序列测定和DNAStar软件分析,结果表明分离出的这1株病毒(四川地区藏獒的CPV分离株)为CPV-2a亚型。
为研究兽医临床常用抗病毒中药注射液的体外抗犬细小病毒(CPV)活性。选用板蓝根、黄芪多糖、清开灵、双黄连、鱼腥草等五种中药注射液,利用体外细胞毒性试验和MTT法试验,评价各中药的抗病毒效果。结果表明,五种抗病毒中药注射液中,鱼腥草、黄芪多糖有直接灭活CPV作用,2-8时鱼腥草、黄芪多糖注射液对细胞的保护率分别可达24％、17％;鱼腥草、双黄连有抑制CPV合成及释放作用,鱼腥草最低保户浓度为2-8,双黄连为2-10;五种中药注射液都有抑制病毒吸附和穿入的作用,其中清开灵作用最强,2-10浓度时对细胞保护率是11.61％,其次是鱼腥草,2-8时对细胞保护率是30.66％,然后是板蓝根,208时对细胞保护率是8.40％,双黄连和黄芪多糖的作用最弱。综合以上数据,鱼腥草注射液有较好的抗CPV作用,其次是双黄连和黄芪多糖。