论文部分内容阅读
目的 研究血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）对人血管平滑肌细胞（Human Vascular smooth muscle cells,HVSMCs）体外钙化的影响及其机制,以探讨血管钙化发生的细胞分子机理。 方法 贴块法体外培养人动脉平滑肌细胞,用β-甘油磷酸（β-GP）诱导建立血管钙化模型。将细胞分为四组:正常对照组、β-GP组、AngII组、β-GP+AngⅡ组,后两组加入10-7mol/L浓度的AngⅡ。采用Vonkossa染色、细胞层钙沉积定量和细胞内碱性磷酸酶（ALP）活性测定判断钙化程度,用流式细胞仪测细胞周期分布和细胞凋亡率。 结果 β-GP组细胞Vonkossa染色见大量黑色颗粒状沉积物,弥漫分布于细胞层,Vonkossa染色强阳性,β-GP+AngⅡ组细胞之间散在分布黑色沉着点,Vonkossa染色呈弱阳性反应,较β-GP组钙化程度明显减轻;10-7mol/L的AngⅡ作用10d后,细胞层的钙沉积为（1.336±0.096）μmol/L,较β-GP组（2.056±0.441）μmol/L降低53.89%（P<0.01）;细胞内ALP活性为（277.57±87.81）IU/L,比β-GP组（691.27±128.06）IU/L降低了59.84%（P<0.01）,非钙化培养组（正常对照组和AngⅡ组）细胞Vonkossa染色、细胞层的钙沉积量和细胞内ALP活性无显著性变化;流式细胞仪结果显示,与β-GP组相比,β-GP+AngⅡ组细胞凋亡率下降,G0/G1期细胞比例降低,S期的比例升高。 结论 10-7的AngⅡ可以在一定程度上抑制钙化血管平滑肌细胞的体外钙化。其作用可能与抑制ALP活性和促进细胞增殖抑制凋亡有关。