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绵羊肺腺瘤病(Ovine pulmonary adenomatosis, OPA或Sheep pulmonary adenomatosis, SPA)的病原—绵羊肺腺瘤病毒(JSRV),目前尚未完全对OPA的复杂发病机制研究清晰,而且关于肿瘤相关细胞因子与OPA发病关联性的研究资料报道较少。研究发现,VEGF、EGFR、TGF-α及EGF四者均与肿瘤新生血管生成、细胞增殖等多个环节密切相关。本研究拟通过检测四者在JSRV-Env重组质粒(pEGFP-C1-env)转染靶细胞后的表达情况,揭示它们与OPA肿瘤发生间的关联性,并对OPA针对上述细胞因子进行基因靶向治疗提供一定的理论依据。本研究选用脂质体法将质粒(pEGFP-C1-env)分别瞬时转染TC-1、TC-1-Hyal2及NIH 3T3细胞;再利用RT-PCR和Western blot两种方法检测Env蛋白在3种细胞中的表达,同时使用激光共聚焦显微镜观察Env蛋白在3种细胞内的定位。最后,采用荧光定量PCR方法和ELISA方法分别检测转染后3种细胞中VEGF、EGFR、 TGF-α及EGF因子的mRNA及蛋白水平的表达。研究结论如下:(1)采用脂质体法成功将质粒pEGFP-C1-env瞬时转染3种细胞,且分别从基因及蛋白水平对Env的表达进行了验证。(2) VEGF、EGFR及TGF-αmRNA及蛋白的表达量均升高,提示JSRV-Env能上调上述细胞因子的表达。(3) NIH 3T3细胞中VEGF、EGFR同时显示过表达,提示二者在JSRV-Env转染后的体外细胞或OPA肿瘤中存在正相关性;以及在肿瘤发生过程中二者可共同发挥一定的促进作用。(4) EGFR在2种小鼠源TC-1、TC-1-Hyal2细胞中的表达情况提示存在低表达现象,EGF因子在同样2细胞中的表达情况提示存在不表达现象。综上所述,JSRV-Env能上调细胞因子VEGF、EGFR及TGF-α表达,这提示它们与OPA疾病发生存在一定关联性。本研究为进一步明确肿瘤相关细胞因子与OPA发生的相关性及OPA发生的分子机制提供了重要的信息,同时也为OPA及人细支气管肺泡癌疾病的基因靶向治疗方案提供重要的理论依据。