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目的：研究不同浓度的乳铁蛋白对体外培养的原代成骨细胞增殖影响及对IGF-1/IGF-1R基因表达的影响，探讨乳铁蛋白抗骨质疏松的分子机制，为临床用药提供实验依据。方法：（1）采用胰酶和Ⅰ型胶原酶混合酶消化法分离获得原代成骨细胞；采用“差速贴壁法”进行纯化。光镜下观察细胞的形态结构和生长状况，通过碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原免疫组化染色SABC法对细胞进行鉴定。（2）取第二代成骨细胞，用不同浓度的乳铁蛋白（0、0.1、1、10、100、1000ug/ml）干预成骨细胞，在1、3、5、7天后，用噻唑蓝比色法（MTT）测定增殖；实时荧光定量聚合酶链反应法（Real time-PCR）检测其对胰岛素样生长因子（IGF-1)及其受体(IGF-1R)基因的表达水平。结果：（1）镜下观察所获得的细胞具有成骨细胞的典型特征，细胞多为单核，呈三角形、多边形、长梭形等形态，并伸有粗大伪足；碱性磷酸酶染色及Ⅰ型胶原免疫组化染色呈阳性。（2）MTT结果显示低浓度（0.1ug/ml）组与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。1ug/ml、10ug/ml、100ug/ml、1000ug/ul组均能促进成骨细胞增殖，与对照组比较，在不同的时间差异有统计学意义（P<0.05）,其中10ug/ml、100ug/ml、1000ug/ul组差异具有显著统计学意义（P<0.01）。随着时间的推移，不同浓度的LF使成骨细胞的数量增加，其中100ug/ml组在第7天细胞增殖数目达到最大。(3)RT-PCR结果显示与对照组相比，10ug/ml、100ug/ml、1000ug/ml组IGF-1mRNA表达量有增加，在不同的时间差异有统计学意义（P<0.05）,其中10ug/ml、100ug/ml组差异具有显著统计学意义（P<0.01）。在时间方面，随着时间的推移，不同浓度的LF使成骨细胞IGF-1mRNA表达量呈增加趋势，与对照组相比，各浓度组在第5、7天IGF-1mRNA表达量有增加，具有显著统计学意义（P<0.01）。（4）RT-PCR结果显示与对照组比较，10ug/ml、100ug/ml、1000ug/ml组IGF-1RmRNA表达量有增加，在不同的时间差异有统计学意义（P<0.05）,其中10ug/ml、1000ug/ml组差异具有显著统计学意义（P<0.01）。在时间方面，随着时间的推移，不同浓度的LF使成骨细胞IGF-1R mRNA表达量呈增加趋势，与对照组相比，各浓度组在第3、5、7天IGF-1R mRNA表达量有增加，差异具有统计学意义（P<0.05），其中各浓度组在第5、7天差异具有显著统计学意义（P<0.01），结论：（1）采用胰酶和Ⅰ型胶原酶混合酶消化法体外分离成骨细胞，在采用多次“差速贴壁法”可以获得数量多且纯，并且活性很好的成骨细胞。（2）乳铁蛋白能促进大鼠成骨细胞增殖，并且能提高IGF-1/IGF-1R mRNA的表达，可能是乳铁蛋白防治骨质疏松的机制之一。