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【背景】重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)是临床常见的危重病,可继发腹腔内高压(Intra-abdominal hypertension,IAH)、肠黏膜屏障功能障碍(Intestinal mucosal barrier dysfunctional,IMBD)、急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)、急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)及脓毒性休克等并发症。SAP约占急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)的10-20%,死亡率接近30%,它对人民健康造成巨大威胁。IAH是SAP的常见并发症之一,若腹内压(Intra-abdominal pressure,IAP)持续升高而得不到有效地控制,可导致脏器功能受损,最终可造成多器官功能障碍综合征(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)。IAH常累及肠道,其造成的肠道功能受损是诱导肠源性内毒素血症甚至全身感染的原因之一,造成病情进一步恶化。至今为止,SAP继发IAH的发病机制尚未完全明确,目前研究认为其与全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)密切相关,这需要进一步证实。血必净注射液,是王今达教授以古方血府逐瘀汤为基础炼制而成的静脉制剂。通过药物化学成分分析,研究者发现其包含了多种具有抗菌消炎活性的有效化学成分。在2004年,血必净注射液被批准上市,用于SIRS、MODS及脓毒血症等疾病的临床治疗。至今为止,多项临床研究提示血必净注射液可延缓SAP患者病情进展,减少并发症,但其具体疗效的机制尚未明确。【目的】本研究以SAP大鼠为研究对象,观察早期应用血必净注射液对SAP大鼠胰腺组织与小肠黏膜病理改变、血浆炎性细胞因子水平、肠黏膜屏障功能以及IAP的影响,探讨早期应用血必净注射液对SAP大鼠IAP的作用及机制。【材料与方法】(1)将15只SD大鼠,随机分为3组:对照组(n=5)、SAP组(n=5)和治疗组(n=5)。(2)SAP组和治疗组大鼠经胆胰管逆行注射4.5%牛磺胆酸钠溶液制备SAP模型,而对照组大鼠仅予经胆胰管逆行注射0.9%氯化钠溶液,治疗组大鼠造模后立即予腹腔注射血必净注射液。(3)成功造模24小时后,评估各组大鼠的一般情况,测量各组大鼠的腹内压及腹水量,经腹腔动脉采血以留取血液标本备检。处死大鼠后分离出大鼠胰腺组织及小肠组织备检。(4)对胰腺及小肠组织标本进行包埋、切片、HE染色及在光学显微镜下评估病理评分。使用全自动生化分析仪检测血浆淀粉酶(Amylase,AMS)。使用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、内毒素(Endotoxin,ET)及二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)的水平。(5)比较三组大鼠的一般情况、IAP、腹水量、胰腺组织病理评分、小肠黏膜病理评分以及血浆AMS、TNF-α、IL-1β、IL-6、ET与DAO水平的差异。【结果】(1)与对照组比较,SAP组和治疗组大鼠的胰腺组织病理评分及血浆AMS水平明显升高(p<0.05),提示本研究采用的SAP模型造模成功。与SAP组比较,治疗组大鼠的胰腺组织病理评分及血浆AMS水平明显下降(p<0.05),提示早期应用血必净注射液可有效减轻SAP大鼠的胰腺组织损伤。(2)与对照组比较,SAP组大鼠的IAP及腹水量明显升高(p<0.05),而治疗组大鼠的IAP及腹水量则无明显差异(p>0.05),提示SAP大鼠早期可出现腹腔积液及IAH。与SAP组比较,治疗组大鼠的IAP及腹水量明显下降(p<0.05),提示早期应用血必净注射液可有效降低SAP大鼠的IAP并减少腹水形成。(3)与对照组比较,SAP组大鼠的小肠黏膜病理评分、血浆ET及DAO水平明显升高(p<0.05),而治疗组大鼠的小肠病理评分及血浆DAO水平也明显升高(p<0.05),提示SAP大鼠在发病早期已出现肠黏膜损伤。与SAP组比较,治疗组大鼠的小肠黏膜病理评分、血浆ET及DAO水平明显下降(p<0.05),提示早期应用血必净注射液可有效减轻SAP大鼠的小肠黏膜损伤。(4)与对照组比较,SAP组大鼠的血浆IL-1β及IL-6水平明显升高(p<0.05),而治疗组大鼠的血浆TNF-α及IL-6水平也明显升高(p<0.05),提示SAP大鼠在发病早期已出现血浆炎性细胞因子水平明显升高。与SAP组比较,治疗组大鼠的血浆TNF-α、IL-1β及IL-6水平明显下降(p<0.05),提示早期应用血必净注射液可有效降低SAP大鼠的血浆炎性细胞因子水平。【结论】(1)早期应用血必净注射液可降低SAP大鼠的IAP,减少腹水形成,有助于可延缓IAH的发生。(2)早期应用血必净注射液可降低SAP大鼠的血浆TNF-α、IL-1β、IL-6、ET和DAO的水平,提示其可减轻SIRS,延缓肠黏膜屏障功能受损的发生,对肠道功能具有保护作用。