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目的本实验在前期动物实验已确定古方天灸药物白芥子散穴位贴敷治疗哮喘最佳配比的基础上,拟从白芥子散对哮喘大鼠气道炎症的病理学改变及对免疫因子的调控角度,探究白芥子散穴位贴敷对哮喘大鼠的治疗作用,为临床治疗哮喘提供理论依据。方法以SD大鼠为研究对象,根据大鼠体重,按均衡随机法分为4组,分别为空白对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、穴位贴敷组(C组)、布地奈德雾化组(D组),每组实验动物10只。按照实验流程对各组大鼠分别施以不同的处理方法,处死后采集标本。1.用形态学方法,测量各组大鼠主支气管与右肺中叶连接处的管腔直径,对比各组大鼠支气管管腔直径的大小,观察白芥子散对哮喘大鼠气道痉挛的影响。2.采用HE染色,通过光镜观察对比4组大鼠肺组织炎细胞浸润程度、支气管上皮细胞脱落程度、支气管管腔内黏栓分泌的多少、气道水肿及闭塞程度等,根据制定的评判标准,对相应指标进行分析统计,直观的反映白芥子散穴位贴敷对哮喘大鼠气道炎性的改善情况。3.采用免疫组化方法,观察IL-4、IFN-γ在大鼠肺组织中的分布表达情况,通过对灰度值进行分析,判断白芥子散对哮喘大鼠免疫失衡的调节。结果1.造模成功断定:与空白对照组相比,哮喘模型组大鼠在症状上及病理上有显著变化,提示造模成功。2.大鼠支气管管腔直径对比结果:通过均值对比,穴位贴敷组>布地奈德组>空白对照组>哮喘模型组,经方差分析,P>0.05,认为四组大鼠支气管管腔直径均数对比无显著差别。3.通过观察肺组织HE染色,对单项病理观察指标分析发现:哮喘模型组与空白对照组相比,P<0.01,差异显著;在气道炎性浸润情况、支气管上皮细胞脱落情况及肺泡间隔增厚程度上,C组及D组与B组相比,P>0.05,无差异;在大鼠支气管管腔内黏栓分泌上,B组与A组相比,P<0.01,差异显著;C组与B组相比,P<0.01,差异显著,D组与B组相比,P>0.05,无明显差异;在大鼠终末细支气管水肿及闭塞情况上,C组及D组与B组相比,P<0.05,有差异。五项病理观察指标累计总分比较,B组与A组相比,P<0.01,整体差异显著,C组及D组与B组相比,P<0.01,整体差异显著,C组与D组相比,P>0.05,说明两种治疗方法对比无差异。4.肺组织中IL-4及IFN-γ阳性表达检测结果分析:对炎性细胞胞浆中IL-4阳性表达灰度值分析,B组与A组相比,P<0.01,差异显著;C组与B组相比,P>0.05,无差异;D组与B组相比,P<0.05,有差异。对上皮间质细胞胞浆中IL-4阳性表达灰度值分析,B组与A组相比,P<0.05,有差异;C组及D组与B组相比,P>0.05,无差异。对炎性细胞胞浆中IFN-γ阳性表达灰度值分析,B组与A组相比,P<0.01,差异显著;C组及D组与B组相比,P<0.01,差异显著。对上皮间质细胞胞浆中IFN-γ阳性表达灰度值分析,B组与A组相比,P>0.05,无差异;C组及D组与B组相比,P<0.01,差异显著。结论1.本次实验所用造模方式,可引起大鼠气道炎细胞浸润、支气管上皮细胞脱落、支气管管腔内黏栓分泌增多、支气管水肿及闭塞、肺间质增宽等,且能促进大鼠肺组织中IL-4的表达,抑制IFN-γ的表达,符合哮喘的一般病理学改变,提示造模成功。2.白芥子穴位贴敷及布地奈德雾化吸入均可扩张支气管,缓解哮喘大鼠气道痉挛,但改变幅度不大。3.白芥子散穴位贴敷与布地奈德雾化吸入对哮喘大鼠病理学改变明显,治疗效果显著,且两种治疗方法对比无差异。两者均能明显减轻哮喘大鼠终末细支气管水肿及闭塞情况。在减轻哮喘大鼠支气管管腔内黏液栓分泌上,白芥子散穴位贴敷明显优于布地奈德雾化吸入。4.IL-4及IFN-γ在炎性细胞中的表达明显高于在上皮间质细胞胞浆中的表达。白芥子散穴位贴敷和布地奈德雾化吸入均能降低哮喘大鼠IL-4的表达,且能提高哮喘大鼠IFN-γ的表达。在对IL-4的调控上,布地奈德雾化吸入优于白芥子散穴位贴敷;在对IFN-γ的调控上,两者无差异。5.白芥子散穴位贴敷治疗哮喘疗效确切,与西药布地奈德雾化吸入对比,无明显差异,疗效相当。