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目的通过K-B法药敏试验、多重PCR、统计学分析软件等研究某综合教学三级甲等医院2005-2008年临床分离344株葡萄球菌属细菌标本类型、临床分布、耐药表型、耐药分子机制等,以期获得该院3年来葡萄球菌属细菌耐药趋势及分子流行病学等重要数据,为临床细菌学诊断、抗生素合理应用及院感监测预防等提供相应的科学指导。方法对所收集的2005年9月-2008年2月344株葡萄球菌(-70℃冷冻保藏),采用K-B法进行27种抗生素药敏试验和红霉素对克林霉素诱导耐药(D-试验)检测;多重PCR法扩增mecA + femB、pvl、qacA/B、ermA、ermB、ermC、msrA、msrB和linA/linA’等基因,利用WHONET 5.4、SPSS 11.5等软件分析以上检测结果数据。结果以PCR检测结果为金标准分析344株葡萄球菌, MRSA、MSSA、MRCNS、MSCNS分别是97、60、144和43株,WHONET分析结果显示,标本主要来源于痰液和创面分泌物/脓液,科室分布前五位的是烧伤科、儿科、ICU、呼吸科、急诊科,分别占22.39%、20.06%、6.98%、6.39%、6.39%;27种抗生素药敏试验结果显示,葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺100%敏感,MRS对其中19种抗生素耐药率超过50%;头孢西丁、苯唑西林纸片法及PCR法对MRSA检出率分别为65.61%(103/157),66.24%(104/157),61.78% (97/157),三种方法对MRSA检出率没有统计学差异(P>0.05);157株金黄色葡萄球菌(SA)mecA+femB基因检出97株(61.8%),187株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS) mecA+femB基因检出144株(77.0%);大环内酯类耐药基因检出分别是ermA 9株、ermB 2株、ermC 48株、msrB 11株、全部阴性的5株,克林霉素诱导耐药基因linA/linA’64株,D试验阳性率18.3%;ermC基因是诱导耐药的主要基因,占75.0%; linA/linA’100%检出;SA菌MRSA pvl基因检出率11.3%,MSSA pvl基因检出率25%,qacA/B基因检出率MRSA(8.2%)略高于MSSA(6.7%),CNS菌qacA/B基因检出率MRCNS(45.1%)远高于MSCNS (16.3%)。结论本课题对某综合教学三级甲等医院2005-2008年临床分离344株葡萄球菌标本类型、临床分布、耐药表型、耐药分子机制等进行了系统性研究,利用头孢西丁、苯唑西林、PCR法对MRSA的检出率均在60%以上,提示临床烧伤、儿科等科室需加强和重视对MRSA的防范;药敏及基因检测结果显示,葡萄球菌一旦携带mecA基因,仅对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺等抗生素敏感;另外,ermC和linA/linA’是该院红霉素对克林霉素诱导耐药的主要分子机制,三种检测方法比较和基因检测,提示分子检测应为临床提供更快捷全面的检测信息,方便临床及时应用或更换药物;葡萄球菌携带pvl及qacA/B基因检出,是院感院监测、防控的重点,同时针对以上信息来制定该院MRS防控手册以加强对葡萄球菌医院感染的预防控制能力;目前,宁夏地区尚未开展细菌耐药的分子研究,本课题将弥补本地区该研究空白,提升宁夏地区临床检验诊断学、分子生物学学科及其研究领域在国内的水平,为最终建立的MRSA耐药、防控模式和宁夏地区“细菌耐药监测网”奠定基础。