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红茶是目前世界上六大茶类中消费量最大的茶叶种类,茶黄素作为红茶中最重要的特征成分之一,除了对红茶品质的贡献外,其卓越的生物活性与功效也逐渐被众多学者所关注。但是,至今关于TF1在体内吸收转运的机制并不十分清楚。本研究通过Caco-2细胞模型及SD大鼠研究了TF1的吸收分布规律;同时也研究了TF1对诱导肥胖SD大鼠体内主要的氧化酶及抗氧化酶系的作用;并通过量子化学计算,从结构效应上解释和预测TF1上的抗氧化活性位点;取得了如下结果: 1.建立了Caco-2单层细胞模型。结果表明,本实验构建的Caco-2细胞模型,在培养21天后,测得其TEER值为474.41±18.18Ω·cm2,阴性对照物荧光素钠在AP→BL端与BL→AP端的转运率分别为1.43±0.17%和1.29±0.13%,AP与BL碱性磷酸酶的活性在培养过程中出现了分化,且AP端显著高于BL端。以上结果表明,本研究所建构的Caco-2单层细胞模型符合体外模拟药物吸收的模型标准。 2.研究了TF1与EGCG在Caco-2单层细胞模型中的吸收机制。根据TF1和EGCG对Caco-2细胞毒性测试,确定了TF1与EGCG在Caco-2单层细胞模型中的安全上载浓度为10~100μM。TF1与EGCG在Caco-2单层细胞模型的吸收呈现表观渗透系数Papp随浓度增加而上升的规律。但两者的外排率也呈现同样的规律,并且外排率上升的幅度均大于二者吸收率上升的幅度。由于TF1与EGCG在细胞单层模型中的Papp均小于1×10-6cm/s,说明两者都属于难吸收的药物。因其外排比均大于2,说明两者在细胞模型上的外排是被动转运。从吸收时间看出,TF1的外排规律与EGCG一致,推测两者均是同样外排蛋白的底物。就TF1与EGCG比较,TF1在细胞模型中的吸收率高于EGCG,但差异并不显著。 3.对TF1在SD大鼠的体内吸收分布的规律进行研究发现,TF1在组织中均有分布,其大小顺序依次为:小肠>胃>前列腺>肝脏>肾脏>心脏。说明TF1能以分子形式被大鼠吸收并广泛存在于体内。 4.用不同含量的茶黄素样品(BTE、TF14、TF50、TF80和TF1)处理高脂食物诱导的肥胖SD大鼠。发现所有处理对大鼠血清和组织氧化酶系XOD和LOX酶活性有不同程度的抑制,对抗氧化酶系CAT、GSH-Px和SOD酶活性有激活作用。 5.通过量子化学计算方法PM6法计算TF1酚羟基的O-H键解离能(BDE),发现TF1抗氧化的活性位点主要集中在C和D环的酚羟基上,并且C1位置的酚羟基的活性最强。并比较了DFT法与PM6法在计算准确度上的差异。发现TF1在HAT,SET-PT和SPLET三种供氢途径上PM6均能有较高的准确性。溶剂的种类和性质对TF1的供氢途径有影响。