南瓜双单倍体育种技术能有效提高南瓜育种效率,南瓜未受精胚珠培养方法是该项技术的主要内容之一。为探讨影响南瓜未受精胚珠诱导因子的最佳状态,试验中对“贝栗灰”品种的取样时期、子房切片厚度、黑暗热激方式、外植体灭菌方式、胚珠培养条件、激素浓度及配比、矿质元素浓度及种类等影响因子进行了研究。研究的主要结果如下:1.影响南瓜未受精胚珠生长因子的最佳状态筛选:(1)南瓜未受精子房开花前一天胚珠膨大转绿率为85%,愈伤诱导率为32.5%。开花当天膨大转绿率为100%,愈伤诱导率为57.5%,因此取样时期为当天开放的材料效果较好。(2)南瓜未受精胚珠子房切片的最适厚度为1.0mm。(3)利用有效氯含量为7%的NaClO溶液消毒6min,南瓜子房片上胚珠膨大转绿数量最多,可达100%,无污染现象。(4)在38℃的温度下,黑暗热激5d,南瓜未受精胚珠均膨大转绿。(5)在室温为30℃,光照强度为2000lx,光照时间为14h/10h的环境下,南瓜未受精胚珠转绿效果最好,可达85%,膨大率为92.5%。2.南瓜未受精胚珠膨大转绿培养基的筛选:在MS培养基的基础上添加1mg/L2,4-D+0.5 mg/L NAA+1mg/L 6-BA(d1培养基)诱导胚珠转绿,转绿率为60%,膨大率达85%。3.在Z培养基(d1培养基基础上添加30mg/LAgNO3)基础上添加矿质元素CaCl2及ZnSO4?7H2O有助于胚珠形成愈伤组织,其CaCl2添加量为40mg/L时,愈伤诱导率可达到100%,转绿率也达100%。4.K2芽诱导培养基能使南瓜下胚轴分化出芽,出芽率达5%,K14生根率达100%。而18种芽分化培养基中,适当的激素组合K15可有效提高南瓜胚珠愈伤诱导率,但最终未能成功诱导出芽,还需进一步试验研究。