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目的:鼻咽癌(NPC)是我国南方地区的高发肿瘤,发病早期主要是以放疗为主,但晚期需辅以适当的化疗。近年来发现,一些化疗药物可通过诱导肿瘤细胞凋亡而达到治疗肿瘤的目的。白藜芦醇(Res),是存在于葡萄、果类、虎杖等多种食用、药用植物中的一种多酚类化合物,近年来发现具有抗癌活性,且这一活性通过诱导肿瘤细胞凋亡而实现。已发现Res可诱导HL-60、人前列腺癌细胞LNaCP、人单核细胞白血病细胞THP-1等凋亡的报道,但迄今未见Res诱导人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE-2Z凋亡的研究报道。高三尖杉酯碱(HHT)是从中国特有的三尖杉属植物中分离出的一种生物碱,已广泛用于白血病的治疗,有诱导HL-60、Molt-3、K562、CML等一些白血病细胞凋亡的报道,但HHT诱导CNE-2Z细胞凋亡尚未见报道。因此,本文的目的是对白藜芦醇和高三尖杉酯碱诱导CNE-2Z细胞凋亡及其机制进行探讨。
方法:MTT法检测IC50值,流式细胞术、Hoechst33258/PI荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳对细胞凋亡进行分析,再用Western-blot、RT-PCR分析蛋白质及mRNA的表达,用比色法(或发色底物法)检测caspase-3、-6、-8和-9的相对活性(A405nm)。
结论:(1)Res50~200μmol/L可诱导CNE-2Z细胞凋亡,其凋亡的可能机制为:Res作为凋亡诱导剂,剂量依赖性地降低Bcl-2的表达,使Bcl-2/Bax的比例减少,从而抑制线粒体对荧光染料罗丹明123的摄取,使▲ψm下降,促使线粒体释放细胞色素C,从而活化caspase-9,激活caspase-9酶原活化途径,使效应caspase-3、-6相继活化,最终导致CNE-2Z细胞凋亡;(2)HHT0.5、1μg/ml可诱导CNE-2Z细胞凋亡,其凋亡的可能机制为:HHT作为凋亡诱导剂,活化caspase-8,激活caspase-8酶原活化途径,使效应caspase-3、-6相继活化,最终诱导CNE-2Z细胞凋亡。