紫花芷蓿总皂甙提取纯化方法优化及农艺学分布特征研究

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紫花苜蓿是我国重要的饲草(forage)资源,分布范围广泛。苜蓿不仅含有丰富的蛋白质,而且含有皂甙、黄酮等重要的活性物质。研究表明,苜蓿皂甙具有抗炎、抗癌、降低胆固醇、提高免疫力等多种药理作用.本文以苜蓿皂甙为对象,研究其检测、提取、纯化优化方法;在此基础上,以三个不同生态地区的29个苜蓿品种为材料,研究皂甙农艺学含量特征及实际生产力水平,以期为苜蓿皂甙产业化利用和育种工作提供科学依据。研究结果如下:   1、苜蓿总皂甙提取、纯化方法优化。以齐墩果酸为标样,检测波长545nm,标准曲线方程为y=51.85127 x-0.05892,相关系数r=0.99941,在0.3107~0.7748mg/100ml范围线性关系良好;比较水溶液提取、乙醇回流提取、超声提取三种方法,确定超声提取为最佳提取方法。提取条件为:超声功率150W,超声时间10min,乙醇浓度70%,固液比1:20;从9种大孔树脂中选出AB-8树脂,确定吸附条件:溶液pH值为5.0,盐离子浓度为1%,原液浓度10.5mg/ml,工作吸附量31.5 mg/ml(湿树脂),吸附流速为3BV,采用3BV蒸馏水洗脱后,用4BV的70%7,醇溶液洗脱,解吸率为78.11%。   2、苜蓿品种农艺学分布特征研究结果。   不同苜蓿品种及同一品种茎、叶总皂甙含量差异显著(p<0.05);不同品种总皂甙含量在0.714~1.69%之间;叶片和茎秆平均总皂甙含量分别为1.673%和0.69%,叶片是茎秆的2.42倍。苜蓿品种在三个不同生育期返青期、现蕾期、初花期总皂甙含量不同,差异显著(p<0.05),在初花期总皂甙含量最高;不同收获茬次苜蓿品种总皂甙含量差异显著p<0.05;生长三年的同品种苜蓿叶片总皂甙积累显著高于生长两年的苜蓿(p<0.05);不同地区苜蓿总皂甙含量研究表明,不同地区不同品种间差异显著(p<0.05),北京地区苜蓿品种全年叶片总皂甙含量较河北吴桥和内蒙地区分别高出0.1967%和0.6148%,同时北京地区第二茬苜蓿叶片总皂甙含量最高,为1.722%,吴桥地区在二茬时期为1.291%,内蒙地区第二茬为1.1819%。   3、苜蓿皂甙生产力水平研究结果。   聚类分析表明,根据草产量和总皂甙产量,可将17个苜蓿品种分为四类。第一类品种为皂甙产量最高的品种,属于此类的品种有1个;第二类品种为皂甙产量较高,草产量最高的品种,属于此类的品种有6个;第三类为草产量较高皂甙产量较低的品种,属于此类的品种有5个;第四类为总皂甙产量和草产量均较低的品种,属于此类的品种有4个。北京地区总皂甙含量高的品种有超级13R美标403T,胖多等;吴桥地区苜蓿总皂甙含量高的品种有胖多,牧野,爱维兰+Z,爱林+Z,射手等;内蒙地区总皂甙含量高的品种有塞特,三得利。
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