中药是中华民族传承千年的瑰宝,因其显著的治疗作用而在世界范围内受到越来越多的关注。一种草药提取物通常包含成百上千种化学成分,这些化合物可能具有显著不同的极性、数量和结构。因此,对中草药的化学成分进行全面的分离和表征一直是分离科学领域的一大挑战。高效液相色谱法（High performance liquid chromatography,HPLC）已被证明是目前最常用和最有效的分离复杂中药化学成分的方法。然而,传统高效液相色谱法一次分析只能从一种植物提取物中分离和检测到多种主要的化合物。近些年来,二维液相色谱的高速发展,给分离中药中的复杂成分提供了新思路。液相色谱根据使用目的的不同,可以分为分析型色谱和制备型色谱,分析色谱更注重分离效果,而制备色谱侧重对样品组分的分离纯化。本文首先将之前构建的一套多辅助调制的在线全二维反相色谱×亲水色谱-质谱系统用于中药人参和三七的分离分析中,在之后的工作中,我们还将其成功放大至制备级别,实现了中药人参和三七中皂苷的二维液相制备分离。具体研究如下:1、以中药三七和人参作为研究对象,采用在线全二维反相色谱×亲水色谱系统分析两种中药中的皂苷成分。在完全相同的分离条件下,实现了对中药三七和人参提取物的全二维液相分析。之后再将二维系统与质谱连用,用于检测化合物的结构信息,得到的质谱数据通过与已有的参考文献进行比对来确认所获得的化合物信息。之后结合质谱比对了人参与三七中分离的皂苷成分差异。2、为进一步研究所构建的在线全二维反相色谱×亲水色谱系统在分离中药方面的应用,我们将整个分离过程放大至制备级别,构建了一套在线全二维制备液相色谱系统。以人参提取物为样品,通过优化分离梯度,实现了对人参提取物中皂苷成分的制备分离。之后为进一步提高制备效率,采用大孔树脂对人参提取物进行除杂浓缩,样品粗分离得到人参三醇和人参二醇组分,由于二醇成分复杂,进一步用于制备二维分析,在进一步优化二醇制备分离条件后,最终在一次制备分离过程中得到28个人参二醇皂苷单体馏分,采用质谱进行结构鉴定,得到的质谱数据通过与已有的参考文献进行比对确认所获得的化合物信息。3、三七中所含皂苷成分与人参中皂苷成分相似,在先前的实验基础上,我们以三七提取物作为样品,在制备条件下优化了分离梯度,成功将该全二维制备液相色谱系统用于中药三七的制备分离。在优化条件下,一次制备分离得到了30个三七皂苷成分单体,结合质谱对单体结构进行鉴定,通过与已有的参考文献进行比对确认所获得的化合物信息。通过对中药三七和人参的在线全二维分析以及全二维制备分离,初步比较了中药人参和三七成分上的差异,同时也表明本文中所建立的在线二维分析以及制备液相色谱系统在中药分析分离中具有巨大的发展潜力。