分子印迹技术是一项模拟抗原抗体空间立体构型互补所开发出的新型生物识别技术，小分子的印迹聚合物的研究已经十分成熟，与之相比，生物大分子印迹技术在分离纯化中的意义更重要。然而，生物大分子由于结构复杂、分子量大，在进出印迹孔穴的过程中受到一定的阻碍；此外生物大分子结构往往容易受环境影响而遭到破坏，对聚合物的制备条件提出了新的要求。对于生物大分子MIP而言，分子印迹微球和分子印迹纳米粒因具有比表面积大、传质速率快等优点，可以大大提高MIP的吸附容量与吸附效率。本研究探索了一种基于温敏纳米凝胶的生物大分子印迹方法，并将温敏凝胶成功的接枝到了纳米硅球表面，在纳米硅球表面实现了对生物大分子的印迹。主要研究内容包括：1)对低温条件下温敏纳米凝胶的制备条件进行了摸索，在50℃和30℃下分别得到了相转变温度合适的温敏纳米凝胶，为模板蛋白BSA和HRP的印迹提供了基础。2)采用温敏纳米凝胶分别对BSA与HRP进行成功印迹。BSA-MIP对于BSA的吸附量（9.6mg/g）显著高于NIP(1.8mg/g)；HRP-MIP对于HRP的吸附量（1.4mg/g）显著高于NIP(0.8mg/g)，30℃下MIP对于HRP的吸附显著高于4℃，也体现了温敏分子印迹聚合物对模板吸附的选择性和可控性。3)在MIP制备过程中引入纳米硅球作为分离介质。纳米硅球经过表面修饰，在其表面成功固定了模板蛋白HRP（0.1μg/g），并成功接枝温敏凝胶实现了对HRP的印迹，此外对HRP-MIP的热稳定性测试表明，凝胶对HRP的包裹对其酶活性有很好的保护作用。纳米硅球表面凝胶包裹条件优化结果表明，对于纳米硅球而言，采用γ-MPS的修饰，拥有小的尺寸（<100nm），以及高于相转变温度的聚合温度成为表面凝胶的生成非常必要的因素。本研究侧重于对生物大分子印迹纳米粒制备条件的探索以及可行性的分析。